pcr挖矿计算

❶ pcr中如何计算原始DNA

引物与DNA单链结合后即形成局部双链,即可在酶的作用下启动脱氧核苷酸链的合成,不断在引物的3端结合脱氧核苷酸.直至复制完成.

❷ 求PCR产物计算公式的推导，过程详细一点！！！

给您一个连接地址，文章是 PCR产物计算公式的推导与修正 http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YNSK200901014.htm
希望能对您有帮助。谢谢！

❸ 做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。

n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。

起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

(3)pcr挖矿计算扩展阅读

传统定量PCR方法简介：

1）内参照法：在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。

在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。

2）竞争法：选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。

扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。

❹ 求助：PCR扩增效率的如何计算

在网上搜到了两个计算realtime PCR扩增效率的公式，但相互不同，不知哪个才是正确的。请大家明辨！
第一种计算：

两个都是通过标准曲线法计算扩增效率，其实是一样的，按照定义理解，完全扩增的话1条变2条，2条变4条，扩增效率200％，但一般通过软件计算都是提供第一种方法（用的比较多），扩增效率最大为100％。本质上两者是相同的。

❺ PCR中Tm值如何计算

引物设计软件都可以给出Tm，引物长度，碱基组成，引物使用缓冲的离子强度有关。
长度为25mer以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size
公式中，Size = 引物长度。

❻ pcr扩增时如何计算各组分的体积（即各种物质根据反应总体积，如何确定其他物质的体积）

固定的反应试剂：比如buffer，dNTP,酶的用量一般都是固定的，按照protocol给出的要求加。
关键是模板和引物的量。模板不能加太多，一般是50ul体系10-100ng左右，体积根据你DNA模板的浓度确定，比如你的DNA浓度是100ng/ul，你加1微升就够了。如果浓度太高，适当稀释一下。
引物的浓度一般是终浓度0.2uM。把引物稀释成10uM的，加1微升到50ul体系里头。最后用水补齐到50ul。加的时候最好先加水，再加buffer，然后模板，引物，最后加酶。冰上操作。

❼ 有关pcr目的基因的计算问题

那是指从一个大片断模板中扩一个相对小一点的片断。第一轮扩增以后，得到的并不是目的产物，（可以参考下图），可以这样理解，如果变性在复性后，得到原来的模板，加一对（两条链）两端凸出中央互补的产物，因为有模板的存在，这个产物每一轮都会增加一个，以线形扩增N轮后有N个。

我们知道总的扩增产物（双链）是指数增长的，N轮后为2^N个（N为循环数）；

第三轮才开始目的产物的指数扩增。在最后的产物中可以认为有模板、两端凸出中央互补的产物（实际上很可能模板的链和非特异产物的链互补在一起）以及特异的产物

因此目的产物=总产物-非目的产物-模板=2^N-N-1

经四轮后为16-4-1=11

其实你只要记住上面公式就行了

❽ PCR模板怎么算

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。

n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。

起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

注意事项

首先是确定的总体积，可以选择10ul, 20ul, 50ul等。

其次是根据mix，算出总体积中mix使用的体积。

根据自己提取或者逆转录得到的DNA浓度，以及一次pcr反应所使用模板的量，计算出DNA的体积。

根据引物浓度以及引物使用的终浓度，计算出引物使用的量。

最后用总体积减去上面几部分的体积，得到的就是水的体积。

❾ pcr 灰区怎么计算

引物设计软件都可以给出Tm，引物长度，碱基组成，引物使用缓冲的离子强度有关。
_ざ任?25mer以下的引物，Tm计算公式为：Tm=4℃(G+C)+2℃(A+T)
_杂诟さ墓丫酆塑账幔_m计算公式为：Tm=81.5+16.6xLog10[Na+]+0.41(%GC)_600/size公式中，Size=引物长度
_CR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
_CR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。
_谑笛橹蟹⑾郑_NA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
_牵_NA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。

❿ pcr扩增计算

1个双链DNA经过10次扩增后，变为2的10次方=1024个，其中带有部分母链的较长的DNA片段有2乘以10=20个，目的基因数=1024-20=1004个，选D