當前位置:首頁 » 幣種行情 » 生物trx是什麼

生物trx是什麼

發布時間: 2023-07-11 09:11:41

❶ 質粒圖譜怎麼看

1.第一步,看箭頭:

大多數質粒都會有箭頭,箭頭有兩種解釋。一種是轉錄方向,轉錄方向主要是由啟動子開始的一個大箭頭,是啟動子啟動序列的順序。另一種是復制起始位點的方向,復制起始位點就是該質粒在大腸桿菌等細菌或真菌中DNA復制的一個方向。

還需要提到的是F1啟動子(圖上的f1 ori)代表的是噬菌體的復制起始方向,只能復制出單鏈的DNA哦,但是可以用來測序。看懂轉錄的方向,這樣就方便設計插入片段的位置和方向性。

2.第二步,看上面的標簽。

報告基因:通常會有一兩個蛋白,被用作報告基因,比如常見的copGFP(綠色熒光蛋白),Puro(嘌呤黴素),Lacz(乳糖操縱子)等等。和抗性基因不同,這樣的報告基因,並不是為了在大腸桿菌擴增質粒的過程中起作用的。

而是在質粒轉入表達體系後起到作用的,基本上就是為了顯示過表達或是敲減的基因是否正常運作。有的報告基因會融合在蛋白中表達,有的會另外用一個獨立的啟動子進行表達(比如shRNA的質粒中)。

3.第三步,看多克隆位點:

MCS(Multiple Cloning Site,也就是多克隆位點),一般圖中會把多克隆位點上的酶切位點都標記出來。上面的酶切位點順序,一般都是按照5`-3`的順序排列下來的,需要注意的是這樣幾點。

第一點是要注意,酶切位點邊標注了*的一般是指並不僅僅存在一個位點,也就不能用來作為構建質粒的酶切位點。

第二點需要注意的是,有的酶切位點,在序列中只有一個,但它上面也會標注一個*或者(dam),這說明可能這個酶切位點會有CpG島的甲基化修飾[常見的是XbaI,TCTAG(6m)A中的TC無法切開],一般也是不能用的。但是非要用這個酶切位點的話,就需要用非甲基化的感受態細胞,如JM109或者JM110。

4.第四步,看多克隆位點的序列:

末端如果有差異的話,可以把基因的ATG(甲硫氨酸)的5`末端替換1-2個鹼基(變成GTG或者GCG這樣),從第二個氨基酸序列開始完全一致即可。而配合擴增和酶切的話,插入片段是允許有3`末端的冗餘。

為了可以應付3`末端的冗餘鹼基,在多克隆位點序列後,會有解碼的終止TAA密碼,即使插入的片段使得3`末端產生了移碼突變,照樣能使表達的蛋白正常終止掉(在酵母雙雜的AD質粒中,由於插入的是隨機cDNA,所以AD的載體上會常見這樣的結構)。

(1)生物trx是什麼擴展閱讀

分類

1.根據質粒能否通過細菌的接合作用,可分為接合性質粒和非接合性質粒。

接合性質粒帶有與接合傳遞有關的基因。非接合質粒在一定條件下通過與其共存的接合質粒的誘動或轉導而傳遞。

2.根據質粒在細菌內的復制類型可分為兩類:嚴緊控制型和鬆弛控制型。

嚴緊控制復制型質粒的復制酶系與染色體DNA復制共用,只能在細胞周期的一定階段進行復制,當細胞染色體停止復制時,質粒也就不再復制。

鬆弛控制復制型的質粒的復制酶系不受染色體DNA復制酶系的影響,在整個細胞生長周期中隨時都可以復制,在染色體復制已經停止時質粒仍能繼續復制。

3.根據質粒的不相容性,可分為不相容性和相容性。

不相容性指結構相似、密切相關的質粒不能穩定地共存於同一宿主細菌內的現象,反之為相容性。常用於流行病學的調查。

❷ 酵母硒在蛋雞中的作用

硒在家禽日糧中具有重要的作用,參與多種功能的發揮。在蛋雞中大量的研究已經證明相比於無機硒,酵母硒具有更好的生物學利用率且能夠改善產蛋性能和蛋品質。酵母硒對蛋雞的性能改善主要與其有效參與機體抗氧化系統、提高機體免疫力和改善輸卵管健康密切相關。本文結合近些年來在蛋雞中硒的研究,對其功能進行了綜述。

關鍵詞:酵母硒,產蛋性能,蛋品質,抗氧化,免疫力,輸卵管

硒最早是1817年被瑞典化學家貝爾采利烏斯發現的,但是直到20世紀50年代法國科學家才首次發現硒對肝臟有保護作用。在過去的幾十年間,人們對硒進行了大量的研究。而在家禽中,硒主要以硒代蛋氨酸的形式參與到蛋白質中形成硒蛋白,另外有一部分是以硒代半胱氨酸進入體內參與體蛋白組成,發揮廣泛的作用。迄今為止已知的硒蛋白有100多種,在機體中發揮著重要的作用。

有機硒在蛋雞中的應用效果

目前家禽日糧中常用的硒源主要有兩種,即無機硒和有機硒,其中無機硒主要包括了硒酸鈉和亞硒酸鈉,有機硒主要是酵母硒等。大量的研究發現在蛋雞日糧中添加有機硒能夠改善蛋雞的生產性能、蛋品質等。楊玉等(2018)研究發現在老齡蛋雞日糧中添加酵母硒(賽樂硒,奧特奇)8周後能夠顯著提高產蛋率並降低料蛋比(表1)。其中添加0.2ppm的酵母硒就能提高產蛋率8.3%,料蛋比改善5.2%。而在試驗的第14天就觀察到添加酵母硒能顯著提高蛋白高度,同時提高了哈氏單位(圖1),表明酵母硒能夠改善雞蛋的新鮮度,從而發揮延長貨架期的功效。除了對內部品質有改善外,酵母硒的使用還能顯著提高試驗第42天的蛋殼強度並且有效的在蛋黃內富集(圖2)。而酵母硒能發揮改善生產性能、蛋品質等作用主要與以下幾個功能密不可分。

表1:飼糧中添加酵母硒對產蛋後期蛋雞生產性能的影響

圖3:在蛋雞日糧中添加不同水平的酵母硒對肝臟GSH-Px1和Trxr1mRNA相對表達量的影響

酵母硒提高機體免疫力

硒蛋白除了參與機體抗氧化功能的發揮外,同時也在免疫系統中發揮重要的作用。Leng等人(2003)選用220隻1日齡伊莎褐蛋雞進行了為期7周試驗,主要比較了酵母硒和無機硒對育雛期蛋雞免疫系統發育的影響。結果發現添加同等水平(0.2ppm)的酵母硒能夠顯著提高心臟、肺、肌胃、脾臟和腎臟中硒的沉積,並且隨著酵母硒添加量的提高其沉積量進一步增加。進一步比較對十二指腸、法氏囊和盲腸扁桃體中相關免疫細胞水平,結果發現與無機硒相比,添加酵母硒能夠顯著提高第1周十二指腸CD3+細胞的數量,有提高第4周法氏囊CD4+細胞和第7周十二指腸CD8+細胞的趨勢(圖4)。而蛋雞免疫系統的發育主要在前6周,前期免疫系統的建立將有益於機體抵抗各種病原菌的入侵,減少疾病的發生。在產蛋期更好的自身免疫力也意味著更好的養分能夠用於雞蛋的沉積。保證雞群的健康才能保證整體的生產性能。

圖4:育雛蛋雞日糧中添加酵母硒對免疫細胞的影響

❸ hpy的中文意思是什麼

代幣融資中一種。hpy是HyperPay項目代幣,這是一款四位一體數字資產錢包,創融合託管錢包、自管錢包、共管錢包、硬體錢包於一體。

代幣融資用區塊鏈代幣(Token)向投資者融資,通常投資者投入的是數字貨幣(如比特幣),獲得Token作為出資證明。這個Token也具有和比特幣一樣的區塊鏈技術屬性,不可篡改,可以轉讓,保證唯一。


(3)生物trx是什麼擴展閱讀

HyperPay自管錢包支持BTC/ETH/EOS/USDT/LTC/BCH/BNB/XRP/HC/TRX/QTUM等43+主鏈幣。HyperPay錢包提供最高級別的安全防護機制,採取冷熱錢包分離存儲方案,80%資金以離線方式存儲,安全專家24小時監視異常,同時採用硬體多重簽名存取款機制、七層安全防護策略、雙重驗證、生物驗證和兩步授權等機制,全方位保障用戶資產安全。

其實這就是一個錢包項目,一個默默無聞的錢包項目。代幣總量26.5億枚,流通量約21億枚。發行在量子鏈上。嗯這個項目不走尋常路,應該是量子鏈資助的項目。

代幣最高價格約2.11元,最低價格約0.003元,現價約0.004元。眾籌價格約0.56元,相比眾籌價格,現價的價格已經是零頭的零頭的零頭了。

這個項目已經事實上歸零了。

❹ 氧化應激的生物標志物

評價方法
氧化應激的定量評價方法大致分做三類:1)測定由活性氧修飾的化合物;2)測定活性氧消除系統酶和抗氧化物質的量;3)測定含有轉錄因子的氧化應激指示物。進一步尚有:1)生物體內氧化應激的程度足以產生應答;2)活體內難以蓄積;3)在活體內不是被代謝,而是穩定存在,等等。理解這些要點對於臨床普及推廣都很有用。
但在臨床上,氧化應激的定量仍舊存在問題。因氧化應激與各種各樣疾病均密切相關,故缺乏特異性,其量化指標難以用於特別指定的疾病。所以目前認為,當用於「全身評價」,或者在已經明確疾病原因為氧化應激後的「嚴重程度及予後」的評價。具有代表性的生物標志物:
8-羥化脫氧鳥苷(8-OHdG)
8-OHdG是敏感的DNA損害標志物,因一個氫氧基接在鳥嘌呤的第8個碳上而形成。不過,其氧化「系由氧化應激所產生的羥自由基誘導」這一點,則為1984年葛西首次報道。8-OHdG由高效液相色譜分離後,容易為電化學方法檢測出,故許多研究室都能進行測定。另外,已於上世紀90年代研製出8-OHdG的特異性單克隆抗體,此後相關論文顯著增加;不但用於理解各種疾病,尚以作為預防醫學健康指標的價值更加受到重視。進一步,近年已使用諸多抗氧化物質進行臨床干預實驗,期待著通過減少8-OHdG,來達到抗衰老和預防疾病目的。
目前報道,可導致8-OHdG上升的疾病就有:慢性病毒性肝炎,系統性紅斑狼瘡,大腸癌以及幽門螺桿菌感染引起的胃炎等。進一步尚了解到,生活方式亦可使8-OHdG增加,比如吸煙飲酒、劇烈運動、進食過飽和紫外線/放射線的暴露等:人們正在探尋,應該採用怎樣的生活方式來控制8-OHdG的水平,形成生活指南,維系個體的健康。
硫氧還原蛋白(TRX)
TRX為細胞內重要的氧化還原調節分子之一;遇有病毒感染、紫外線和環境污染物等各種刺激時,將誘導其細胞內表達。即使TRX單獨存在也可表現出對單態氧和羥自由基的消除作用,除可作為抗氧化劑使用之外,還用做還原蛋白的二硫鍵。進一步,就突觸傳遞, TRX能夠抑制ASK1和p38MAPK的活化。再者,認識到TRX也同樣向細胞外釋放,顯示其細胞因子/趨化因子樣作用。有報告指出,在與人類疾病的相互關系方面,HⅣ感染者和丙型肝炎患者的血清中,可出現TRX濃度的上升。此外尚注意到,對包括風濕性關節炎在內的自身免疫性疾病、缺血再灌注損傷以及慢性心功能不全之類可導致氧化應激的疾病,亦均可應用TRX做有效評價。TRX已有檢測試劑盒。
氧化應激導致的疾病
⒈糖尿病
看法一:胰島素抵抗源於氧化應激 高游離脂肪酸(FFA)刺激的後果是高活性反應分子 性氧簇(ROS)和活性氮簇(RNS)生成增多,從而啟動了氧化應激機制(高活性反應分子產生和抗氧化作用之間長期失衡而引起組織損傷)。這些活性分子可直接氧化和損傷DNA、蛋白質、脂類,還可作為功能性分子信號,激活細胞內多種應激敏感信號通路,這些信號通路與胰島素抵抗和β細胞功能受損密切相關。
看法二:氧化應激損傷胰島β細胞
β細胞也是氧化應激的重要靶點 β 細胞內抗氧化酶水平較低,故對ROS較為敏感。ROS可直接損傷胰島β細胞,促進β細胞凋亡,還可通過影響胰島素信號轉導通路間接抑制β細胞功能。β細胞受損,胰島素分泌水平降低、分泌高峰延遲,血糖波動加劇,因而難以控制餐後血糖的迅速上升,對細胞造成更為顯著的損害。
2004年Ceriello教授提出共同土壤學說,即氧化應激是IR、糖尿病和心血管疾病的共同發病基礎,04年是學說,09年已經成為了不爭的事實。
看法三:氧化應激加速動脈粥樣硬化 低密度脂蛋白(LDL)在動脈內膜的沉積是動脈粥樣硬化(AS)始動因素在血管細胞分泌的ROS作用下,「原始」LDL成為氧化型LDL(ox-LDL),刺激內皮細胞分泌多種炎性因子,誘導單核細胞黏附、遷移進入動脈內膜,轉化成巨噬細胞。ox-LDL還能誘導巨噬細胞表達清道夫受體,促進其攝取脂蛋白形成泡沫細胞。同時,ox-LDL是NADPH氧化酶激活物,能增強其活性、促進ROS產生,也更有利於LDL氧化為ox-LDL。另外,ox-LDL能抑制NO產生及其生物學活性,使血管舒張功能異常

❺ 什麼是詞根

。(詞根和詞綴叫構詞語素)也就是說,單詞一般由三部分組成:詞根、前綴和後綴。詞根決定單詞意思,前綴改變單詞詞義,後綴決定單詞詞性。
[編輯本段]主要詞根
詞根 詞根解釋 例詞 ache=ache 痛 earache 耳痛 ag=do, act 做,動 agent 代理人 agri, agro=agriculture 田地,農田 agriculture 農業,農藝 ann, enn=year 年 annual 每年的,年度的 astro, aster=star 星 astronomy 天文學 audi, audit=hear 聽 audible 聽得見的 bell=war 戰爭 rebellion 反叛,反抗 bio, bi=life 生命,生物 biology 生物學 brev=short 短 abbreviate 縮短,節略 ced, ceed=go 行走 precedent 先行的,在前 cept=take 拿,取 exception 例外,除外 circ=ring 環,,圓 circle 圓,圈,環狀物 cid, cis=cut, kill 切,殺 suicide 自殺 claim, clam=cry, shout 喊叫 exclaim 呼喊,驚叫 clar=clear 清楚的,明白的 clarify 澄清;使清楚 clud, clus=close, shut 關閉 exclude 排斥,拒絕,接納 cogn=know 知道 cognition 認知 cord=heart 心 cordial 衷心的,誠心的 corpor, cor=body 體 corporation 團體,社團 cred=believe, trust 相信,信任 credibility 可信,可靠, cruc=cross 十字 crucify把……數答釘在十字桇上;折磨 cur=care 關心,掛念,注意 security 安全 cru, crus, cour, cours=run 跑 cruise巡航艦 di=day 日 diary 日記 dit=give 給 edit 編輯 dict,dic=say 言,說 dictator 獨裁者,口授者 c, ct=lead 引導 conct 引導,指導,經營 ed=eat 吃 edible 可以吃的,食用的 ev=age 年齡,時代 longevity 長壽,長命 fact, fac=do, make 做,作 factory 工廠 fer=bring, carry 帶,拿 different 不同的,相異的 flor, olour=flower 花 florid 如花的,華麗的 flu=flow 流 fluency 流利,流暢 fus=pour 灌,流,傾瀉 refuse 拒絕,拒受 geo=earth 地 geography 地理學 gon=angle角 trigon 三角形 grad=step, go, grade 步,走,級 graal 逐步的 gram=write 寫 telegram 電報 graph=write, writing 寫,畫 photograph 照相,拍照 gress=go, walk 行走 progress 進步 hap=chance,luck,accident 機會,偶發 happen 發生,巧遇好殲 hibit=hold 拿,持 exhibit 展出,展覽 hospit, hosp=guest 客人 hospitable 好客的 idio=particular, own, private, proper 特殊的,個人的,專有的 idiom 慣用語,方友畢沖言 insul=island 島 insular 島的,偏狹的 it=go 行走 exit 出口,退出 ject=throw 投擲 projection 投擲,發射 lect, leg, lig=choose, gather 選,收 elect 選舉 lev=raise 舉、升 elevate 抬起,使升高 liber=liberty 自由 liberation 解放 lingu=language 語言 linguist 語言專家 liter=letter 文字,字母 literate 識字的,有文化的 loc=place 地方 local 當地的 log=speak 言,說 dialogue 對話 loqu=speak 言說 eloquent 有口才的,雄辯的 lun=moon 月亮 lunar 月亮的,似月的 nanu, man=hand 手 manuscript 手稿 mar=sea 海 marine 海上的,航海的 medi=middle 中間 mediate 居中調解,調停 memor=memory,mindful 記憶,記住的 memory 記憶,記憶力 milit=soldier 兵 military 軍事的,軍隊的 mini=small,less 小 minimum 最小數 mir=wonder 驚奇,驚異 admire 贊賞,欽佩 mort=death 死 mortal 終有一死的 mot=move 移動 motion 運動,動 nomin=name 名 nominal 名義上的,有名無實的 nov=new 新 novel 新的,新奇的 numer=number 數 numeral 數字,[語]數詞 oper=work 工作 operation 手術,工作,操作 ori=rise 升起 orient 東方,東方的 paci=peace 和平 pacify 使和平,撫慰 past=feed 喂,食 pasture 放牧、牧場,吃草 pel=push, drive 推,逐,驅 propel 推動 pend, pens=hang 懸掛 pendent 懸空的,懸而未決的 pet=seek 追求 compete 競爭,比賽 phon=sound 聲音 phone 電話 plen=full 滿,全 plenty 大量,豐富 pone=put 放置 postpone 推後,推遲 popul=people 人民 population 人口,全體居民 port=carry 拿,帶,運 import 輸入,進口 pos=put 放置 expose 揭露,揭發 preci=price 價值 precious 寶貴的,珍貴的 pur=pure 清,純 purify 使純凈 rect=right, straight 正,直 correct 改正,糾正 rupt=break 破 rupture 破裂,使裂開 sal=salt 鹽 salary 薪水 sci=know 知 science 科學 sec, sequ=follow 跟隨 sequence 繼續,連續 sect=cut 切割 section 切開,一部分 sent, sens=feel 感覺 sentiment 感情,思想感情 son=sound 聲音 sonic 聲音的,音速的 spect=look 看 spectate 出席,觀看 spir=breathe 呼吸 inspire 鼓舞,吸入 tail=cut 切,割 tailor 裁縫,成衣商 tain, ten=hold 握,持,守 contain 容納,包含,內裝 tect=cover 掩蓋 detect 偵查,發覺 tempor=time 時 temporary 暫時的,臨時的 tend, tens=draw 拉 tension 拉緊,引力 tent, tract=draw 拉,抽,引 tractor 拖拉機 urb=city 城市 suburb 郊區,近郊 ut=use 用 utility 效用, 有用 vac, vacu=empty 空 vacancy 空白,空虛 vad, vas=walk, go 行走 invasion 入侵,侵略 vari=change 變化 variable 可變的,反復的 ven=come 來 convene 召集(會議),集會 vert, vers=turn 轉 subvert 推翻,顛覆 vi, via=way 路 via 取道,經由 vis, vid=see 看 visible 可見的,看得見的 vit=life 生命 vital 充滿活力的 viv=live 活 vivid 活潑的,有生氣的
[編輯本段]前綴形式
開放分類:英語、語法、學習、詞彙 [prefix]以結合形式出現,與一詞、詞根或短語開頭的一個音或連續幾個音相接,或書寫中一個字母或連續幾個字母用以產生出派生詞或變化形式。漢語里指在詞根前面的構詞成分。如「阿哥」、「阿姨」中的「阿」 英文中: 一個英語單詞可以分為三個部分:前綴(prefix),詞根(stem)及後綴(suffix)。單詞中位於詞根前面的部分就是前綴。前綴,可以改變單詞的意思。 常見的前綴有如下幾類:第一類:表示正負(或增減)的,如:un-in-im-il-ir-non-mis-mal-dis-anti-de-under-re-over-等;第二類表示尺寸的,如:semi-equi-mini-micro-macro-mega-等;第三類表示位置關系,如:inter-super-trans-ex-extra-sub-infra-peri-等;第四類表示時間和次序,如:ante-pre-prime-post-retro-等;第五類表示數字,如:semi-mono-bi-tri-quad-penta-hex-sept(em)-oct-dec-multi-等;其它類別,如:pro-auto-co-con-等。
一.表示否定的前綴
1.dis-加在名詞、形容詞,動詞之前。 disadvantage(缺點)dishonorable(不光彩的)disagree(不同意) 2.in-加在形容詞,名詞之前 incorrect(不正確的),inability(無能,無力),inaccurate(不準確的) 3.im-加在字母m,b,p之前 impossible(不順能的),impolite(不禮貌的),impudence(厚顏無恥) 4.il-加在以l開頭的詞前 illegal(非法的),illiterate(文盲的,無文化的)illogical(不合邏輯的) 5.ir-加在以r開頭的詞前 irregular(不規則的),irresistable(不可抵抗的),irresolvable(不能分解的,不能解決的) 6.un-加在名詞,形容詞,副詞之前 unfinished(未完成的)undoubted(無疑的)unemployment(失業) 7.non-加在形容詞,名詞前 non-existence(不存在),non-essential(不主要的),non-electrical(非電的) 8.mis-加在動詞、名詞之前 misunderstand(誤解),misjudge(誤判),misleading(誤導),misfortune(不幸) 9.dis-加地動詞之前 disappear(消失),disarm(解除武裝),disconnect(失去聯系) 10.de-加在名詞,形容詞之前 demobilize(遣散;使…復員)decolor(脫色,漂白) 11.anti-加在名詞、形容詞之前 anti-Japanese(抗日戰爭),anti-social(厭惡社會的,反社會的),antidote(解毒葯) 12.counter-加在名詞、動詞前 counterattack(反攻,反擊),counteract(抵抗,阻礙)counterrevolution(反革命) 13. a-在名詞前,表示相反,加強 arrest,affluent
二.表示「前before」的前綴
1.pre- preconception(成見),pre-exsiting(先於……而存在的),pre-selection(選舉前的)preface(前言) 2.Ante- anteroom(前室,接待室),antecessor(先行者,先驅者) 3.Fore- forehead(前額),foreground(前景),foreman(工頭,領班),foresee(預見,先見),foretell(預言) 4.Pro- programme(計劃),prologue(序幕) 5.Ex- ex-president(前任總統)ex-wife(前妻)
三.表示其他的前綴
表示「後-post」的前綴 1.post- post-war(戰後),post-plsition(後置詞),postmeridian(下午) 表示「低」、「下」的前綴 1.Hypo- Hypocrisy(偽善,虛偽),hypothesis(假設),hypochlorite(次氯酸鹽) 2.Infra- Infra-red(紅外線),infrahuman(低於人類的),infrasonic(亞聲的,次聲的) 3.Sub- Sub-editou(副編輯),sub-way(地鐵),sub-conscious(下意識的),submarine(海下的),subtropical(亞熱帶的),subtitle(副標題) 表示「回」、「再次」、「向後」的前綴 1.Re- Refuel(給…加油),retranslate(再譯),reinforce(加強),reconstruct(重建),return(返回) 2.Retro- Retrograde(倒退的),retrospect(回顧) 表示「共同」、「和」的前綴 1.Co- co-exist(共存),co-operate(合作),co-ecation(男女同校) 表示「相互」、「之間」的前綴 1.Inter- Interchangeble(可互換的),interdipendert(互相依靠的),international(國際的),inter-national(交往) 表示「出」、「超出」的前綴 1.Ec- Eclipse(蝕),ecstasy(狂想) 2.Extra- Extraordinary(非凡的),extramural(校外的),extrasensory(超感覺的) 表示「超過」的前綴 1.hyper-,preter-,super-,sur-,ultra- hyper-sensitive(過敏的),preterhuman(超人的)
其它的前綴
1.auto-自 automatic(自動的),auto-autobilgraphy(自傳) 2.mal-壞,惡 Malnutrition(營養不良),maltreat(虐待) 3.Micro- Microscope(顯微鏡),microtome(切片機) 4.Tele-遠 Telegram(電報),telephone(電話),telescope(望遠鏡) 5.Demi-,semi-hemi- Semi-circle(半圓),hemisphere(半球),demilune(半月,新月) 6.Uni-,mono-(單一,單獨) Monotone(單調),monologue(獨白),uniform(制服) 7.Bi-,di-二 Biyearly(二年一次的),biweekly(二周一次的),dichloride(二氯化物) 8.Tri-三 Triangle(三角),tripld(三角架) 9.Multi-多 multi-colored(顏色多樣的),multi-national(多國的) 10.Poly–多 Polygon(多角形),polytomic(多原子的) 11.Arch-首領 archbishop(大主教),architect(建築師) 12.bene-善,好 benefit(利益),benevolence(善意) 13.homo-同 homosexual(同性戀的),homograph(同形異義字) 14.neo新 neo-colonialism(新殖民主義),neolithic(新石器時代的) 15.ortho-正確,直 orthogonal(直角的),orthodox(正統) 16.philo-摯愛 philosopher(哲學家) 17.proto-原始 protohydrogen(初氫),prototype(原型),protoplasm(原生質) 18.pseudo-假的,偽的,冒充的 pseudonym(匿名),pseudo-communism(假共產主義) 19.a-,ab-,abs-(只有在t,c之前)從,自 avoid(避免),absent(缺少的),abstain(抑制),abstract(吸引) 20.Apo-,aph-來自 apology(道歉,謝罪),apostle(倡言者,先驅) 21.se-分離 separation(分開),secure(安全的),sedition(煽動叛亂) 22.para-防 parachute(降落傘), 23.omni-所有的,公共的 omnibus(公共汽車),omnipotence(萬能) 24.pan-全,泛 Pan-American(全美的),pancean(萬靈葯),panorama(風景的全貌;萬花筒) 25.panto-全 pantisocracy(烏托邦大同世界),pantoscopic(視野廣大) 26.dia-通過,藉以 diagonal(對角的),diagnosis(診斷),dialogue(對話) 27.Per-通過,徹底,不利 perambrlate(走來走去),perfect極好的 28.trans-通過,橫過 transcript(抄本,副本;記錄),translation(翻譯),trxnsparent(透明的),transport(運輸),trans-plant(移植) 29.Com-,con-,cor-,col-共同,和,完全 comment(評論),compile(編輯),correlation(相互關系),collect(收集),corruption(貪污腐敗),collaborate(合作,合著) 30.syn-共同 synonym(同義詞),synchronization(同步),syntonic(諧振的),synthetic(人工的,合成的) 31.meta-和,在……之後 metaphor(比喻),metaphysics(形而上學) 32.Cis-在這一邊 cisatlantic(大西洋這邊的) 33.pen- 把關入圍欄, 囚禁 peninsular(.住在半島上的居民,半島(狀)的,形成半島的) 34.en-,em-往……里,使…… encamp(扎營),enable(使……能),endear(使……受喜愛),embrace(擁抱,抓住(機會)) 35.intro內在 intracardiac(心臟內部的),intramolecular(分子內部的),intracellular(細胞內部的) 36.intro-到……中 introce(介紹),introspect(反省,內省) 37.dys-壞 dyspepsia(消化不良),dysentry(痢疾) 38.Eu-優,美好 eulogy(頌詞),euphony(悅耳的聲音) 39.ambi-,amphi-兩者 amphibian(兩棲的),ambidextrous(兩只手都很靈巧的;心懷二意的;非常靈巧的) 40.penta-五 pentagon(五角大樓),pentagram(五角星),pentameter(五步詩句) 41.sex-六 sexangle(六角),sexennial(六年一度的) 42.sept-七 September九月(古羅馬的七月),septennial(七年一度) 43.hepta-七 heptab(七個成套之物),heptagon(七角形) 44.octa-,octo,oct八 octagon(八角形),octuple(八倍)October(十月) 45.nona-,ennea-九 nonagon(九角形),ennead(九個一組) 46.deci-,deca-十 decimal(十進位的),decagramme(十克) 47.centi-百 centimeter(厘米),centipede(蜈蚣) 48.milli-千 millenary(千年的),millimeter(毫米) 49.Kilo-千 kilowatt(千瓦),kilometer(千米)
[編輯本段]後綴形式
開放分類:英語、語言 後綴是一種重要的構詞法,通過後綴我們常常可以判斷出一個詞的詞性。下面分四大類分別講解一些常見後綴及其含義:
一、名詞後綴
常見的此類後綴及其具體含義如下: 1.-ster,-eer,-er(or)意為:從事某種職業或參與某種活動的人()例詞:gamester,gangster,songster,engineer,profiteer,mountaineer,auctioneer,driver,teacher,director,actor,professor 2.-let意為:小或者不重要的東西(small,unimportantthings)例詞:booklet,leaflet,starlet 3.-ette意為:1)小的東西(small)例詞:cigarette2)假的東西(imitation)例詞:leatherette3)女性(female)例詞:usherette 4.-ess意為:女性(female)例詞:actress,poetess,hostess,paintress 5.-hood意為:時期(status;etc.)例詞:boyhood,childhood,manhood 6.-ship意為:才能,狀態,資格,品質等(skill,state,condition,status,quality)例詞:leadership,friendship,membership,lectureship,sportsmanship 7.-ful意為:量(theamountwhichnouncontains)例詞:cupful,handful,mouthful,spoonful 8.-tion,-ion意為:1)狀態,行動等(state;action;etc.)例詞:action,oppression,possession,ecation,starva-tion2)機構等(institution;etc.)例詞:organization,foundation 9.-ment意為:狀態,行動等(state;action;etc.)例詞:movement,enslavement,pavement 10.-al意為:動作(action)例詞:arrival,refusal,revival,recital,removal 11.-age意為:程度,數量等(extent;amount;etc.)例詞:wastage,coverage,acreage,shrinkage,breakage,hostage 12.-ness;-ity(ty)意為:狀態,品質(state;quality;etc.)例詞:happiness,usefulness,selfishness,kindness,rapidity,activity,sanity,changeability 13.-ism意為:道義,主義,學說等(doctrineof,practiceof)例詞:idealism,impressionism,absenteeism,racism
二、動詞後綴
常見的此類後綴及其具體含義如下: 1.-ify意為:轉為,變為(toturninto,tomakeorbecome)例詞:beautify,diversify,simplify 2.-ize;-en意為:使……,變得……(tomakeorbecome;tomakeinto)例詞:modernize,popularize,legalize,hospitalize,symbolize,ripen,widen,heighten,threaten 3.-ate意為:增加,使……(giveoradd,makeorbecome)例詞:originate,hydrogenate,validate,differentiate
三、形容詞後綴:
常見的此類後綴及其具體含義如下: 1.-ful意為:充滿,有(fullof;hav-ing;giving;etc.)例詞:useful,pitiful,hopeful,helpful,forgetful,thankful,fearful 2.-less意為:沒有,無(without;notgiving)例詞:speechless,childless,harmless,hopeless,meaningless 3.-ly意為:有……品質的(havingthequalitiesof)例詞:beastly,manly,brotherly,friendly 4.-like意為:像……的(like)例詞:childlike,statesmanlike,tiger-like 5.-y;-ish意為:像……一般的(somewhatlike)例詞:meaty,sandy,silky,hairy,leafy,watery,foolish,girlish,blackish,thinnish 6.-some意為:像……一樣的;引起……的;有……品質的(like;causing;havingthequalityof)例詞:troublesome,burdensome,wholesome,tiresome,bothersome 7.-able(ible)意為:能……的;可以……的(abletobe;capable)例詞:changeable,readable,drinkable,comfortable,expansible,convincible 8.-ed意為:有……的(having,etc.)例詞:wooded,pointed,moneyed,odd-shaped 9.-al意為:有……屬性的,……類型的(natureof,typicalof)例詞:cultural,personal,regional,musical 10.-ary(ory)意為:屬於……的,與……相連的(belongingto;connectedwith)例詞:revolutionary,imaginary,contradictory 11.-ous意為:富含……的;有……品質的;像……的(fullof;havingthequalityof;like)例詞:glorious,erroneous,malicious,gracious 12.-ic(ical)意為:……類的;屬於……的(typicalof;belongingto)例詞:historic,historical,methodic,methodical,dramatic,heroic 13.-ive意為:有……屬性的;有某種傾向的(havingthenatureorqualityof;givenortendingto)例詞:attractive,talkative,restrictive,defensive,preventive,constructive,sensitive
四、副詞後綴
常見的此類後綴及其具體含義如下: 1.-ly意為:以……方式(ina...manner;etc.) 例詞:happily,boldly,attentive-ly,strangely 2.-ward(s)意為:表示方式或動作的方向(manneranddirectionofmovement)例詞:onward(s),backward(s),earthward(s),homeward(s),eastward(s) 3.-wise意為:1)按照……方式(inthemannerof)例詞:crabwise,clockwise2)就……而言(as faras...isconcerned)例詞:weatherwise,ecationwise
[編輯本段]詞性簡寫
n.名詞 v.動詞 pron.代詞 adj.形容詞 adv.副詞 num.數詞 art.冠詞 prep.介詞 conj.連詞 interj.感嘆詞

❻ motif 在分子生物學中是什麼意思 怎麼翻譯

motif是在許多蛋白質分子中,由幾個具有二級結構的肽段在空間上相互接近、相互作用,所形成的折疊模樣稱為超二級結構,又稱為模體。鋅指結構是一種常見的模體。

motif在生物學中是一個基於數據的數學統計模型,典型的是一段sequence也可以是一個結構,是特定的group的序列預測,例如一個DNA sequence可以定義為轉錄因子結合位點,也就是序列傾向於被這種factor結合。

對蛋白質來說,sequence motifs可以被定義為蛋白質(蛋白質序列)屬於一個給定的蛋白質家族。一個簡單的motif可以是,例如,一個模式pattern,而這個模式被這個group中的所有成員共享。

例如WTRXEKXXY(這里,X代表任何氨基酸)。當然也有更復雜的motif模型。Motif有時和特定的功能聯系一起。

motif在生物學上翻譯成,模體,模序,基序等。

(6)生物trx是什麼擴展閱讀

常見模體:

1、左手超螺旋——3根右手α-螺旋擰到一起形成一個左手超螺旋;

2、右手超螺旋——3根左手螺旋擰到一起形成一個右手超螺旋,如膠原蛋白;

3、捲曲螺旋——相鄰的2根右手α-螺旋擰到一起形成一個左手超螺旋;

4、螺旋束——多個α-螺旋的聚合體;

5、β-折疊-α-螺旋β-折疊,即βαβ;

6、β-發夾環——兩個反平行β-股由一個環相連;

7、α-螺旋-β-轉角-α-螺旋,即αβα;

8、α-螺旋-環-α-螺旋(EF手相);

9、Rossmann捲曲——也稱Rossmann折疊,它由兩個βαβ連在一起,形成βαβαβ結構,通常能結合輔酶I;

10、希臘鑰匙模體——是一種全β折疊聚合體,存在於許多不同類型的蛋白質中,因在拓撲學上像古代花瓶上的希臘鑰匙而得名,清蛋白原就含有這種模體。

❼ 健身私教課用的小器械有哪些

健身私教課 用的小器械一般有瑜伽球,健腹輪,等。

拓展材料:

健身運動可以採用各種徒手練習,如各種徒手健美操、韻律操、形體操以及各種自抗力動作。也可以採用各種不同的運動器械進行各種練習,如啞鈴、杠鈴、壺鈴等舉重器械,單杠、雙杠、繩、桿等體操器械,以及彈簧拉力器、滑輪拉力器、橡筋帶和各種特製的綜合力量練習架等力量訓練器械,還有功率自行車、台階器、平跑機、劃船器等有氧訓練器材。

健身運動的動作方式是多種多樣的,既有成套的各種徒手健美體操;也有球、棒等輕器械體操,這些主要用於女子健美訓練,藉以減肥和改善體形體態,提高靈活性,增強韻律感;更有許多能發達身體各部位肌肉的舉重練習動作和其它動作。這些動作主要用於男女強壯體魄、發達肌肉,也用於男女健美訓練。

為了達到形體健美的目的,需要有專門的訓練方法。例如採用杠鈴等舉重器械做各種動作時,在器械的輕重、動作的做法,安排的組數、次數,運動的速度等方面都有特殊的要求和安排。

健身長跑可提高呼吸系統和心血管系統機能 科學實踐證實,較長時間有節奏的深長呼吸,能使人體呼吸大量的氧氣,吸收氧氣量若超過平時的7—8倍,就可以抑制人體癌細胞的生長和繁殖。其次長跑鍛煉還改善了心肌供氧狀態,加快了心肌代謝,同時還使心肌肌纖維變粗,心收縮力增強,從而提高了心臟工作能力。

健身長跑有利於防病治病 健身長跑使血液循環加快,對排泄系統有害物質起到清洗作用,從而使有害物質難以在體內停留和擴散。據測定得知,16分鍾跑3000米或25分鍾跑5000米,可降低血液中膽固醇。這對老年人易患不同程度的高血脂症,繼而引起血管硬化、冠心病、腦血管病等有著良好的預防作用。

健身長跑有利於心情舒暢、精神愉快 這種長跑因其不重視比賽勝負,只求在輕松愉快中健身,因此對緩解現代社會高節奏和激烈運動帶來的精神心理緊張十分有益。據醫學專家介紹,這種輕松愉快的運動最能促進體內釋放一種多肽物質——內啡吠,從而使人產生一種持續的欣快感和鎮靜作用。另外,由於長跑使人情緒飽滿樂觀,有助於增進食慾,加強消化功能,促進營養吸收。

長跑鍛煉對於培養人們克服困難,磨煉刻苦耐勞的頑強意志具有良好的作用。特別是對那些冬季怕冷愛睡懶覺不想鍛煉的人起到促進作用,從而使人他們嘗到健身長跑鍛煉的好處。

健康長跑需要注意速度的快慢,盡量保持在自己身體所能適應的速度,切忌過於猛烈的快速長跑,尤其是不經常跑的,初次可能會在次日手腳酸痛,因為劇烈運動產生的乳酸造成。

網路——健身

❽ 內源性活性物質的葯用價值

內源性活性物質,所謂內源性,就是指身體內含有,與人的生存和健康息息相關,尤其對皮膚抗衰老有巨大貢獻。它們攝入不足,就會削減皮膚的免疫、抗損傷能力,造成皮膚衰老。目前,內源性活性物質已廣泛運用於美白、保濕以及抗衰老等功效型化妝品中。以具有抗衰老功效的化妝品為例,此類護膚品中多數都含有維生素C、E,神經醯胺,透明質酸,超氧化物歧化酶SOD等天然內源性物質。隨著分子生物學和生物化學的不斷發展,越來越多的內源性生物活性物質會展現其葯用價值。
以下列舉幾種具有抗衰老作用的內源性活性物質:
(1)乙醯化六肽(祛皺肽)
抗衰老原理:曾經有生物學家說過,補肽就等於補生命,可見肽對於抗衰老的重要性。祛皺肽,學名又叫乙醯化六肽,類肉毒素成分,它有肉毒素的功能,但沒有肉毒素的毒性。阻斷肌肉神經傳遞速度,從而抑製表情紋及細小皺紋的產生多肽通常由10-100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物。多肽是人體重要的生理調節物,它可全面調節人體生理功能,有效抗擊衰老。
(2)維生素C
抗衰老原理:提起維生素C,相信沒有人會陌生。它是水溶性物質,能夠重建真皮表皮結合部,促進膠原纖維生成。此外還具有很強的清除自由基能力,同時也是增強身體免疫力不可缺少的成分。研究證明,經常補充維生素C的人比普通人的壽命更長,它富含於瓜果蔬菜當中,胡蘿卜、西紅柿和柑橘類水果中都含有豐富的維C。
(3)二勝肽 抗衰老原理:勝肽最近一直是化妝品科研領域最熱門的話題,因為勝肽成分先進,效果顯著,被很多葯妝品牌使用。但是勝肽的價格很貴,所以添加了勝肽的產品也賣的比較貴。一般來說,勝肽能促進膠原蛋白,彈力纖維和透明質酸增生,提高肌膚的含水量,增加皮膚厚度以及減少細紋。繼之前的五勝肽與六勝肽大熱之後,最近二勝肽也被廣泛的應用在了抗衰老的護膚品中。
(4)透明質酸
抗衰老原理:它是透明的人體天然保濕成分,可以持久保濕,促進其他活性成分的吸收,為真皮膠原蛋白和彈性纖維的合成提供良好的環境,減輕老化皺紋痕跡。
(5)維生素E
抗衰老原理:它是被研究和應用最多的抗老成分之一,屬於人體主要的脂溶性抗氧化物,可以清除體內自由基以阻斷氧化反應的生成,並減輕和修復細胞膜損傷,達到抵抗衰老的作用。由於細胞中只含有極少量的維生素E,且人體自身無法合成,所以只能從外來補充物中獲得,未精製的植物油、杏仁、堅果油等都含有較多的維生素E。
(6)SOD
SOD是Super Oxide Dimutese縮寫,中文名稱超氧化物歧化酶,是生物體內重要的抗氧化酶,廣泛分布於各種生物體內,如動物,植物,微生物等。SOD具有特殊的生理活性,是生物體內清除自由基的首要物質。SOD在生物體內的水平高低意味著衰老與死亡的直觀指標;現已證實,由氧自由基引發的疾病多達60多種。它可對抗與阻斷因氧自由基對細胞造成的損害,並及時修復受損細胞,復原因自由基造成的對細胞傷害。由於現代生活壓力,環境污染,各種輻射和超量運動都會造成氧自由基大量形成;因此,生物抗氧化機制中SOD的地位越來越重要!
(7)蛋氨酸亞碸還原酶A(MsrA)蛋氨酸亞碸還原酶A是繼超氧化物歧化酶之後的另一種引起自由基醫學界和老年醫學界廣泛關注的抗氧化酶。與超氧化物歧化酶相比,它不僅可以在細胞內發揮清除氧化因素的作用,還可以對已經發生蛋白質氧化進行有效修復,增加它的水平和活性可以延長多種生物的壽命。蛋氨酸亞碸還原酶A的表達在多種衰老組織中顯著下降。
蛋氨酸亞碸還原酶A(MsrA)是目前發現的可在生物體內還原逆轉蛋白質蛋氨酸殘基氧化結構變化和功能損傷的主要抗氧化酶系統。硫氧還原蛋白(Trx)是一種低分子量、進化上高度保守的有還原二硫鍵氧化產物活性的蛋白質,主要功能是調節細胞胞內氧化還原平衡,參與氧應激誘導的細胞凋亡。它既是MsrA系統在體內發揮功能最重要的伴侶分子,同時也是還原體內半胱氨酸殘基氧化最重要的功能分子。
最新研究表明,華中科技大學曾建華博士等人利用基因工程技術開發的 ,可以進入細胞顯著減少氧化應激引起的細胞損傷,清除氧自由基並降低氧化應激引起的蛋白質氧化水平,減少衰老過程中脂質過氧化引起的細胞損傷,緩解衰老過程中脂質過氧化引起的病理變化。
總之,我國未來葯物、葯妝品發展應抓住機遇,面向未來,充分利用人類基因組及蛋白質組計劃提供的信息,注意開發能控制人類疾病的內源性活性物質作為治療葯物。21世紀,人類的基因組和蛋白質組資料一定會成為新葯開發和發展的重要基礎。許多生物技術公司和制葯公司已開始意識到未來在使用這些信息方面有著巨大的潛力,我國亦應充分給予重視,並給予較大投入。

❾ 土壤的組成成分

土壤是地球岩石最表層經億萬年風化和生物活動所形成的物質。迄今為止,絕大多數作物都是在土壤上栽培。土壤是生物圈、岩石圈、大氣圈和水圈的交匯點。普通人常常認為土壤只是固體。其實,土壤由固體顆粒、土壤溶液和土壤空氣三部分組成。土壤由固體顆粒構成有大小孔隙的土壤結構,土壤水分(溶液)占據土壤的中小孔隙,土壤空氣占據土壤大孔隙。 土壤固體大顆粒稱為砂粒,中等粒徑的顆粒稱為粉粒,細小顆粒稱為粘粒。根據三種土粒含量不同,將土壤分為12類,其中較為典型的有三種:砂粒含量特別多的是砂土;粘粒含量特別多的是粘土;而砂粒、粉粒、粘粒三者比例相等的是壤土。壤土的土壤耕性最好,土壤水氣比例最易達到理想范圍,土壤溫度狀況也較易保持和調整,也就是說,壤土的土壤物理性質最理想。砂土往往氣多水少,溫度易偏高。粘土則水多氣少,溫度易偏低,緊實粘重。 土壤水氣比例對土壤氧化還原電位有影響。土壤氧化還原電位影響土壤中一些微量元素的有效性。水多氣少使土壤氧化還原電位降低,鐵、錳等離子大多還原為有效態,但也容易從土壤中淋失。 土壤礦質顆粒和有機質顆粒都帶負電,對土壤中的陽離子有吸附性。土壤粘粒所能吸附的鹽基陽離子總量稱為陽離子交換量,土壤粘粒上吸附的陽離子與土壤溶液中的陽離子不斷進行交換,達成動態平衡。施肥或通過其它途徑進入土壤溶液的養分陽離子大多先被土壤粘粒吸附,待植物根系吸收利用掉溶液中的養分陽離子時,被吸附的交換性陽離子再逐漸解吸釋放進入土壤溶液,補充被吸收的部分。養分由土壤到植物的機理當然比這樣簡單的描述要復雜得多。 陽離子交換量中鈣、鎂、鉀、鈉四種鹼性離子所佔陽離子交換量的百分比叫做鹽基飽和度。做鹽基飽和度較高的土壤肥力較高,土壤pH值也較高。 土壤pH值包括土壤活性酸度和潛在酸度。土壤活性酸度土壤溶液中表觀的H+活度,而潛在酸度與陽離子交換量(又稱土壤緩沖能力)有關。 現在越來越強調土壤管理的重要性。土壤管理主要涉及對土壤物理性質的保護,同時兼顧土壤化學性質,與土壤耕性、土壤肥力和防止土壤侵蝕有關。 http://trxh.999pcs.com/kejian/turangxue/turangxue_cai/chap.13/13-2.htm

❿ 蛋白質融合標簽

蛋白標簽(Protein tag)技術是指利用基因克隆手段,將具有特定功能的多肽,蛋白質結構域,甚至完整蛋白質與目標蛋白融合在一起,以實現目標蛋白的表達純化,檢測和示蹤等應用的技術。蛋白標簽融合已經成為蛋白質研究中最常用的技術之一,下面我就為大家盤一盤這些常用標簽的特點及應用。

蛋白標簽根據其功能,大致可以分為檢測標簽、表達純化標簽和示蹤標簽三類。

蛋白質的檢測方法包括質譜、酶活檢測、免疫分析等,其中應用最為廣泛的是免疫分析,常用的方法有:WB(Western Blot)、ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)、IP(Immunoprecipitation)等。免疫分析需要將目標蛋白作為抗原,注射動物,然後從免疫血清中分離抗體,根據抗原-抗體間的免疫反應進行特異性檢測。這種方法最大的缺陷就是每更換一個目標蛋白就要制備一個對應的抗體,操作繁瑣,成本昂貴。融合標簽的使用,使蛋白質免疫分析走向通用化和便利化。我們將特定的標簽與目標蛋白融合後,兩者是共同表達的,通過檢測融合標簽,可以得到目標蛋白的表達情況。經過長期的研究,目前已經開發出一些比較成熟的檢測標簽,下面就挑幾個來介紹一下:

1) HA

HA標簽,屬於小標簽,共9個氨基酸,標簽序列YPYDVPDYA,源於流感病毒的紅細胞凝集素表面抗原決定簇,對目標蛋白的空間結構影響小, 可融合到N端或者C端,可購買商業化的Anti-HA抗體檢測。HA標簽常用於蛋白質印跡,免疫熒光和免疫沉澱實驗,偶爾用於ELISA和ChIP分析。

2) His

His標簽,也是小標簽,多指6個組氨酸多肽,該標簽對目標蛋白的空間結構影響極小, 可融合到N端或者C端,一般無需切除也不會對目標蛋白功能產生影響,可購買商業化的Anti-His抗體檢測。His標簽常用於蛋白質印跡實驗。

3) c-Myc

Myc標簽,包含人類原癌基因Myc的10個氨基酸區段,序列為EQKLISEEDL,可融合到目標蛋白N端或者C端。由於可獲得高特異性抗Myc單克隆抗體,因此在Western印跡,免疫熒光和免疫沉澱實驗中被廣泛使用,但是很少用於蛋白質純化。目前,市場上已有很多可供選擇的商業化c-Myc抗體。

4) Flag, 3×Flag

FLAG標簽,是目標蛋白中一種比較流行的短肽標簽,序列為DYKDDDDK,可以與蛋白質的C端或N端融合。由於其包含腸激酶的識別位點(DDDDK),可方便去除,因此比較適合融合在目標蛋白N端。Flag標簽與同類標簽相比,更具親水性,因此通常不會變性或使與其連接的蛋白質失活,常用於真核表達系統中目標蛋白的檢測。目前已經開發出性能更好的3×Flag 標簽,共22個氨基酸,分子量2.7KDa。3×Flag標簽序列不是唯一的,有文獻直接用3個Flag的串聯重復,這不利於標簽的去除,常用的序列為序列為DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK。3×Flag可免疫原性和與抗體的親和性得到極大增強,適用於真核生物低水平表達的蛋白的檢測和純化。目前,市場上已有很多可供選擇的商業化Flag及 3×Flag抗體。

5) S

S標簽,是一段來源於胰腺核糖核酸酶 A(RNase A)N 末端的短肽,氨基酸序列為KETAAAKFERQHMDS。 通常將 S-tag 構建到目標蛋白的 N 末端或 C 末端上,可以使用商業化的 S-tag 抗體進行免疫檢測。此外,S-tag與S-蛋白質(同樣來自於RNase A)之間有強烈相互作用,因此S-tag可用於蛋白質純化,但由於洗脫條件較苛刻,為了獲得有功能的蛋白質推薦用蛋白酶切割標簽,然後洗脫目標蛋白。

6) T7

T7標簽,一種源自T7噬菌體衣殼蛋白的表位標簽,序列為MASMTGGQQMG,可融合到目標蛋白質的N或C末端,可購買商業化的Anti-T7抗體檢測。T7標簽常用於蛋白質印跡實驗。

7) V5

V5標簽,是猿猴病毒5(SV5)副粘病毒P和V蛋白上存在的小表位(Pk)短肽,序列為RNA聚合酶α亞基的95-108位氨基酸殘基GKPIPNPLLGLDST,可被融合到目標蛋白的N或C末端。在文獻報道中,大多將V5融合到目標蛋白C端,常用於哺乳動物和昆蟲細胞表達系統蛋白質印跡,免疫熒光和免疫沉澱檢測。

蛋白質純化的方法有很多,離子交換、疏水層析、分子篩和親和層析,其中純化效果最好的無疑是親和層析,它利用基質與蛋白標簽間的特異性結合,以極高的得率和純度獲得目標蛋白。下面就挑幾個常用的純化標簽來介紹一下。

1) His

His標簽,大多是指六個組氨酸組成的融合標簽,即His6,可融合在目的蛋白的C末端或N末端。His標簽在蛋白質純化領域可謂是「最靚的仔」,1987年,Hochuli等首次提出利用組氨酸標簽純化蛋白質,至今His標簽在蛋白質純化領域仍有最廣泛的應用。組氨酸殘基側鏈與固定的鎳離子有強烈的吸引力,可用於固定化金屬螯合層析(IMAC)。標簽的分子量小,只有約0.84KD,一般不影響目標蛋白的功能,此外His標簽也可用於免疫檢測,而融合His標簽的蛋白免疫原性較低,可將純化的蛋白直接注射動物進行免疫並制備抗體。

2) GST

GST(谷胱甘肽巰基轉移酶)標簽,是蛋白質純化最常用的標簽之一,GST是大標簽,它是一個完整的蛋白質,分子量約26KD。GST一方面具有高度可溶性,能夠增加目標蛋白的可溶性;另一方面它可以在大腸桿菌中大量表達,提高目標蛋白的表達量。因此被廣泛應用於各種融合蛋白的表達,可以在大腸桿菌和酵母菌等宿主細胞中表達。GST標簽融合蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠的親和樹脂進行純化,用10mM 還原型谷胱甘肽洗脫,可得到高濃度、高純度融合蛋白。不過由於GST標簽較大,通常需要將該標簽切除,因此GST一般融合在靶標的N端。對於目標蛋白為活性酶的情況,如果經過活性驗證確認GST對酶的活性沒有影響,也可以保留標簽。目前,也有很多商業化的GST抗體可用於對目的蛋白進行用特異性檢測。

3) MBP

MBP(麥芽糖結合蛋白)標簽,是蛋白質純化最常用的標簽之一,也是大標簽,分子量大小在40kDa以上,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加目標蛋白在細菌中的溶解性,尤其是真核蛋白,也可以增加融合蛋白表達量。MBP可以和交聯澱粉親和樹脂結合,結合的融合蛋白可用10-20mM麥芽糖在溫和條件下洗脫,得到高純度、高濃度目標蛋白。MBP的特點與使用方法與GST十分相似,也有專門的商品化抗體進行檢測。需要注意的是,MBP序列有兩種形式,一種N端含有信號肽,適用於毒性蛋白的表達純化,一般融合在N端;一種不含信號肽序列,可融合在N端或C端,多融合在N端。

4) CBD

CBD標簽,一般是指來源於枯草桿菌的幾丁質結合結構域,分子量約5kDa,該標簽由NEB公司推出,結合其IMPACT(Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)系統,用於(毒性)目標蛋白的表達與純化。在IMPACT系統中,CBD和一個來源於酵母的intein蛋白質組成一個雙效的融合標簽。Intein是一個蛋白質剪接元件,類似於基因組中的內含子,intein在較低的溫度和還原條件下發生自身介導的N端裂解,可以釋放出與之相連的目的蛋白。也就是說融合表達產物在掛上親和層析柱後只需要在低溫(4℃)條件下用含DTT,或者巰基乙醇,或者半胱氨酸的溶液洗脫,即可將目的蛋白洗脫,而將融合標簽留在純化柱上,而還原劑的小分子可以非常簡單的去除。後來NEB推出了IMPACT-CN系統(即融合標簽可以選擇在目的蛋白的C端或者N端)和更加靈活便利的IMPACT—TWIN系統,感興趣的可以自己去了解下。
(我使用過該系統,但效果並不像宣傳的那麼理想,原因有兩個:1)因為要使用DTT作為切割劑,不適合含有內部二硫鍵蛋白質的純化 2)融合基因在體內體外均存在較大的自剪切風險,在純化毒性較大的蛋白質時,很難得到目標蛋白。)

5) Strep-tag

Strep標簽,一般指Strep-tag II,是長度8個氨基酸的短肽,序列為WSHPQFEK,可以融合在目標蛋白N端或C端。Strep標簽融合蛋白與鏈黴菌抗生物素蛋白柱上的基質特異性結合,D-生物素或其衍生物可作為洗脫劑,從而實現融合蛋白的特異性純化。由於,抗體柱十分昂貴,Strep標簽在蛋白純化中並不常用。

6) Halo-Tag

Halo標簽,是一種細菌脫鹵素酶的遺傳修飾衍生物,可與多種合成的Halo-Tag配基有效地共價結合,分子量為33KDa,可融合在重組蛋白的N端或C 端,並在原核和真核系統中表達。

7) SNAP-tag

SNAP-標簽,是一種人的O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉移酶的突變體,長度為182個氨基酸,分子量約19 kDa,可與任何目標蛋白質融合,並進一步用合適的配體(例如熒光染料)進行特異性和共價標記。將純化的或未純化的SNAP-Tag融合蛋白與表面固定了苯甲基鳥嘌呤的基質混合,蛋白即可特異與底物作用,形成共價鍵,融合蛋白間接被固定在了基質表面上,可以達到更方便快捷地研究蛋白功能或純化蛋白的目的。SNAP-Tag是新一代的蛋白標簽技術,不僅專一性極高而且穩定,最大的優點是適用於多種環境下的蛋白質檢測與純化,如活細胞內、溶液中、或固態相(如SDS-PAGE gels)等。

8) SUMO

SUMO標簽,是一種小分子泛素樣修飾蛋白(Small ubiquitin-like modifier),在一級結構上與泛素只有18%的同源性,但兩者的三級結構及其生物學功能卻十分相似。研究發現,SUMO可以作為融合標簽,不但可以提高融合蛋白的表達量,且具有抗蛋白酶水解以及促進目標蛋白正確折疊,提高重組蛋白可溶性等功能。此外,使用SUMO蛋白水解酶,能識別完整的SUMO標簽,並高效的把SUMO從融合蛋白上切割下來。該標簽主要用於改善目標蛋白的表達,並非常用的純化標簽,要用於純化可採用雙標簽。

9) NusA、TrxA、DsbA

NusA標簽是一種反轉錄終止因子,能增加融合蛋白的溶解度和表達;TrxA標簽是硫氧還蛋白,幾乎存在於所有生物中,它即可能會增加融合蛋白的溶解度,方便地純化細菌粗周質提取物,也有助於外源基因形成二硫鍵;DsbA標簽是蛋白質二硫鍵異構酶,能夠增加目標蛋白溶解度,有助於形成二硫鍵。

這三種標簽,主要用於改善目標蛋白的表達,本身不用於純化,必須與另一個親和標簽聯用方可實現蛋白質純化。而且這三種標簽均具有細胞周質定位作用,因此一般融合在目標蛋白N端。這三個都屬於大標簽,可能會影響融合蛋白的性質,一般來說純化後需要去除。

示蹤標簽主要是指利用標簽本身的熒光或者催化底物發射熒光或者可見光,來檢測目標蛋白在生物體內定位、轉移、互作的情況。示蹤標簽一般分子量較大,需要在標簽與目標蛋白之間加Linker序列,避免兩個蛋白相互影響各自的功能。示蹤標簽可與檢測標簽聯用,用於目標蛋白的檢測分析,也可與純化標簽聯用用於後繼純化。

1) GFP、EGFP、YFP

GFP(Green fluorescent protein,綠色熒光蛋白)標簽含有 238 個氨基酸,分子量約為 26.9 KDa,在維多利亞多管發光水母中發現的,在紫外線的照射下會發出綠色的熒光的蛋白,與靶蛋白融合後不會顯著地影響天然蛋白質的組裝和功能。EGFP 標簽是增強型綠色熒光蛋白,與 GFP 相比,具有更高的折疊效率(由於正確折疊的蛋白質比例更高而增加的熒光),熒光強度更強、熒光性質更穩定。YFP(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)標簽,可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體,其熒光向紅色光譜偏移。這些標簽與目標蛋白融合後,可以通過激光共聚焦顯微鏡,觀察融合蛋白在生物體內的情況,常用於亞細胞定位、熒光共定位分析、在體熒光成像等實驗。示蹤標簽可以加在目標蛋白的N端或C端,這個要視具體的情況而定,比如細胞定位示蹤,如果定位序列位於目標蛋白N端,標簽就要加在C端;如果定位序列位於C端,標簽就要加在N;如果定位序列位於中間,可以加在N端或C端。

2) 螢光素酶

螢光素酶(Luciferase,Luc)常作為「報告蛋白」被用於分子生物學研究中,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶,他們可以催化熒光素底物發射熒光,作為示蹤標簽常用於活體成像、葯物分析等領域。攜帶熒光素酶標簽(Luc)的質粒轉染入細胞後,導入研究動物如大小鼠體內,之後注入熒光素底物,通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或葯物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。

3) Gus

Gus標簽,是細菌β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase),能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解。該酶可將X-Gluc水解生成藍色物質,初始產物並不帶顏色,為無色的吲哚衍生物,後經氧化二聚作用形成5,5』-二溴-4,4』-二氯靛藍染料,此靛藍染料使具有GUS活性的部位或位點呈現藍色,可用肉眼或在顯微鏡下觀察到。因為絕大多數植物細胞內不存在內源的GUS活性,因此gus基因廣泛用作轉基因植物的報告基因。用作融合標簽時,gus標簽可放在目標蛋白的N端或C端,所產生的融合蛋白一般仍具有GUS活性,這對研究外源基因表達的具體細胞部位提供了方便條件。

當然不是,幾乎任何標簽都可以作為檢測標簽。不過上面這些標簽應用比較廣泛,檢測靈敏度較高,對應抗體、試劑等也比較成熟,是最為常用的檢測標簽,在加檢測標簽時,可以作為首選。

當然也不是,檢測標簽、純化標簽、示蹤標簽,在功能上沒有絕對的界限,所有的檢測標簽也可以用於純化,只不過需要先制備對應的抗體固定到純化基質上,比如S標簽需要S蛋白固定到純化樹脂上,這就需要購買專門的純化柱料,十分昂貴。當然也可以採取通用的做法,比如通過protein A吸附抗體,再利用抗體吸附融合的目標蛋白,但是這樣做純化效率可能不太高,吸附能力也有限,而且成本較高(protein A柱料的價格是Ni-NTA柱料的5-10倍),雖然這種方法可以得到極高的純度,但並沒有被普遍採用。

標簽選好了,那到底是該加在N端還是C端呢?在較多的報道中,標簽一般加在目標蛋白的C端,因為蛋白質折疊是從N端開始的,加在N端有被目標蛋白包埋的風險。但是,目前沒有統一的標准,要具體情況具體分析,最好參閱相關文獻。

一般檢測標簽都是小標簽,對目標蛋白的功能與結構影響不大,N端C端皆可。需要注意的是採用雙標簽的情況,如果是兩個小標簽,那就一邊一個,一般不建議串聯兩個不同的標簽,比如一個3×Flag檢測標簽,一個His純化標簽,那就應該把3×Flag放在N端,His放在C端,因為純化之後大概率需要切除3×Flag,如果兩者交換位置就無法實現這樣的目的。

His標簽是應用最廣泛的標簽,既可以用於純化也可以用於檢測,而且大多數情況不需要切除,加在N端存在提前終止翻譯和無法終止翻譯的可能,產生的副產物不利於分離純化;加C端時存在次級翻譯起始的可能,產生的副產物也不利於分離純化,雙端His有利於目標蛋白的准確檢測與純化,但可能影響酶的活性。

純化標簽分子量較大,多數情況下要被切除,因此一般放在目標蛋白N端,檢測標簽放在C端,如過必需將大的純化標簽放在C端,檢測標簽可放在目標蛋白N端或者融合蛋白C端。但檢測標簽不能放在目標蛋白與純化標簽之間。

對於GFP標簽,大多用於目標蛋白的細胞定位,應此標簽的位置就由定位序列位置決定,定位序列在C端,GFP就應該放在N端,檢測標簽應該放在GFP的N端;反之,GFP應放在C端,檢測標簽放在GFP的C端。

當融合標簽對目標蛋白的功能與結構沒有影響時,不需要切除融合標簽,這不是只針對小標簽,大標簽如GST、MBP等也是如此,NEB公司純化的一些核酸工具酶就是融合了MBP標簽的,我曾融合表達了MBP-APOBEC3A,MBP並不影響APOBEC3A的C→T活性,基因編輯技術中的AE和CE點編輯系統,就是基於Cas蛋白與APOBEC蛋白各自的功能實現的。兩者分子大小相差極大但功能互不影響,就是因為各自的功能結構域折疊比較穩定,且無蛋白質間相互作用。如果融合標簽與目標蛋白也滿足這種關系,基本是不用去除標簽的,不過這種影響是不可預料的,可以參考相關文獻或者做預實驗確定。
常用的去除蛋白標簽的蛋白酶,及其識別序列如下表。

[1] Protein tag[維基網路], https://en.wikipedia.org/wiki/Protein_tag
[2] Kimple M E, Brill A L, Pasker R L. Overview of affinity tags for protein purification[J]. Current protocols in protein science, 2013, 73(1): 9.9. 1-9.9. 23.
[3] Marintcheva, B. Viral Tools for Protein Expression and Purification. Harnessing the Power of Viruses, 2018, 103–131.
[4] Terpe, K. Overview of tag protein fusions: From molecular and biochemical fundamentals to commercial systems. Appl. Microbiol. Biotechnol., 2002, 60: 523–33.
[5] Nilsson, J. et al. (1997) Affinity fusion strategies for detection, purification, and immobilization of recombinant proteins. Protein Expr. Purif., 1997, 11: 1–16.
[6] Malhotra A. Tagging for protein expression[M]//Methods in enzymology. Academic Press, 2009, 463: 239-258.

熱點內容
螞蟻A3礦機是挖什麼幣 發布:2025-06-24 00:52:47 瀏覽:437
和家長合約怎麼寫 發布:2025-06-24 00:52:19 瀏覽:248
trx850出售 發布:2025-06-24 00:51:29 瀏覽:224
區塊鏈內容上鏈 發布:2025-06-24 00:39:45 瀏覽:136
這么久沒習慣幣圈的大起大落 發布:2025-06-24 00:38:58 瀏覽:95
doge幣不用挖礦嗎 發布:2025-06-24 00:37:10 瀏覽:807
區塊鏈幣圈新項目 發布:2025-06-24 00:33:30 瀏覽:904
03usdt等於多少人民幣 發布:2025-06-24 00:29:21 瀏覽:753
批量生成eth收款地址 發布:2025-06-24 00:16:45 瀏覽:988
目前一枚比特幣的價格大約為人民幣 發布:2025-06-24 00:16:04 瀏覽:41