TRX背景
① 地球上馬力最大的量產皮卡 道奇Ram1500 TRX發布
[汽車之家新車首發]?在福特F-150猛禽獨守細分市場10年之後，終於有選手願意挑戰它的地位了。道奇Ram正式發布了基於最新一代Ram1500Rebel車型的Ram1500TRX車型，新車定位於越野高性能皮卡，最大功率702馬力，峰值扭矩881牛·米。
『圖為F-150猛禽性能勁化版』
除了澎湃的動力，福特F-150猛禽還配備了能夠應付更強沖擊的懸架與減振器組合，可以支持車輛本身自帶的包括「Baja」模式在內的多種駕駛模式。
編輯總結：
我相信此刻觀眾朋友們最關心的問題便是，這樣一款車是否會正式引進國內銷售。在目前這個階段我只能說，如果按照乘用車來報關那麼肯定沒戲，6.2升發動機造成的排量稅會讓這輛車的價格高到不可理喻。當然，如果還是像F-150猛禽那樣按照卡車來報關，那麼各種稅費會低廉很多，只不過城市通行政策以及15年強制報廢就是需要仔細權衡的問題了。參考底特律其他兩家車企都向祖國正式輸出過自己的看家皮卡車型，我覺得這款Ram1500TRX還是有那麼一點可能引進國內銷售的。（文/汽車之家丁伯駿）
② 米其林的企業背景是什麼
米其林
在1898年裡昂的第一次展覽會上，米其林兄弟發現牆角的一堆直徑大小不同的輪胎很像人的形狀。不久後畫家歐家洛就根據那堆輪胎的樣子創造出一個由許多輪胎組成的特別人物造型，於是，米其林輪胎人一一「必比登」誕生了。從此他成為了米其林公司個性鮮明的象徵。 一個多世紀以來，必比登以他迷人的微笑，可愛的形象，把歡樂和幸福幾乎帶到了世界的每個角落，已經成為家喻戶曉的親善大使，米其林也因此而揚名天下。20世紀末，由一些著名藝術家。設計師、建築師、零售商、廣告與發行業者組成的國際評審團在對本世紀最佳50個企業標志的評選中，魅力十足的必比登最終征服了評委們的挑剔眼光。
從孩子的玩具到美其林的誕生
1898年是輪胎人必比登的生日，可米其林公司的創建卻是從早於60多年以前開始的。1832年，在那個還沒有汽車的年代，馬車是人們唯一的代步工具。米其林兄弟的祖父巴比爾(Barbier)與其表兄多伯利(Daubree)合股，在法國科列蒙一一費昂(Clermont—Ferrand)開辦了一間小型的農業機械廠，起初只生產一些供小孩子玩耍的橡皮球玩具，之後便開始製造橡皮軟管、橡皮帶和馬車制動塊，並出口到英國去，這就是米其林公司的雛形。1889年5月28日，愛德華·米其林繼承了祖父的事業，並在其兄弟安德魯·米其林的幫助下正式創立了米其林公司，愛德華也成為了第一任管理者，現代的米其林公司就是從此發展而來的。 當愛德華接手工廠的時候，工廠還在生產工藝簡單的制動塊。1889年，一個偶然的事件引起了米其林兄弟對自行車的注意，他們設想如果自行車輪胎能夠容易的更換，那它必將有更廣闊的發展前景。米其林輪胎的故事便從此開始了。1891年米其林兄弟終於研製出可在十五分鍾內拆換的自行車輪胎，並賦有遠見地為他們第一件成功的發明申請了專利。這種可方便更換的輪胎在隨後的各種自行車比賽中得到了最好的驗證，也很快被大眾認可。短短一年中，他們的產品已有10000名使用者。 1894年，米其林將剛剛發明的輪胎裝在了公共馬車上，代替了傳統的鐵制車輪，使乘車人感受到前所未有的舒適與安靜。 1895年，在神奇的交通工具——汽車誕生一段時間以來，很少有人對它有足夠的信心，原因之一就是硬質的「輪胎」無法充分保護車輪的力學結構，經常導致斷裂，研製和推廣新式汽車充氣輪胎迫在眉睫。當時，所有汽車廠家都不敢在比賽中裝備米其林的充氣輪胎，為了宣傳和證實產品的優點，米其林兄弟設計製造了自己的汽車一一標志公司的車身，4馬力的戴姆勒發動機，最主要的是安裝了可更換的米其林充氣輪胎。在巴黎—波耳多—巴黎的汽車賽事中，兩兄弟親自上陣，出色地跑完了全程，並在巴黎轟動一時，很多好奇的人甚至把輪胎切開，尋找其中的奧秘。比賽驗證了充氣輪胎在汽車上的適用性，同時也把第一條汽車輪胎的誕生寫進了歷史。 1899年，一輛裝備米其林加寬輪圈(extensible-—rim)的電動汽車創造了100公里／小時的驚人速度；1906年，米其林發明了可拆換的汽車輪輞； 1908年，米其林開發的對於後輪開始在載重貨車和公共汽車上使用，1900—1912年，米其林的輪胎在所有大型國際汽車賽事中都取得了成功，米其林兄弟也找到了一條為公司和其產品揚名的有效途徑一一汽車比賽。
「走」向世界
20世紀初，米其林開始圍繞著歐洲和北美主要的汽車製造中心迅速建立了自己的生產基地，力求與朝氣蓬勃的汽車及運輸業並肩發展。1906年，「米其林輪胎有限公司」和第一家海外生產廠同時在倫敦和義大利都靈成立，此時，米其林在費昂的員工已經發展到4000名。到1908年，美國Milltown的工廠也生產出了北美第一條米其林輪胎。 1914年，第一次世界大戰打響了，米其林轉而為法國政府設計和生產轟炸機，他們生產的飛機能裝載400公斤炸彈、能達到100公里／小時的速度和200公里的續航里程，這在當時算得上性能精良了。從19l5到1918年，米其林共生產了1884架飛機，而且還建造了世界上第一條水泥跑道。可以說第一次世界大戰成為米其林展示其領先科技的又一舞台。 1919年，戰爭結束，米其林又干起了老本行，戰後汽車數量的增長強烈刺激了輪胎業的發展；同年，平行線層輪胎已經漸慚代替了橡膠帆布輪胎；1923年，世界上第一隻低壓(2．5bars)舒適型旅行輪胎誕生了，壽命延長到15000公里。1927一1931年間，在英格蘭和德國也出現了米其林的生產廠，同時在義大利，第二座輪胎廠投人生產……。
不斷創新
30年代，對於米其林來說是不斷創新和進步的十年：在嘗試了自行車、汽車和飛機之後，米其林又對火車產生了興趣，並於1929年製造出第一條鐵路輪胎，為鐵路運輸帶來了安靜、舒適、靈敏的加速和平穩的制動，1930年，米其林為其嵌入式管狀輪胎申請了專利，這就是現代無內胎輪胎的祖先；1932年，胎壓更低的(1．5bars)的超舒適型輪胎面世，壽命達到30000公里；1934年，米其林推出了具有特殊花紋的超舒適制動型輪胎，以盡量避免汽車在濕滑路面上出現滑水情形，1937年，米其林發明了寬截面的派勒(Pilot)輪胎，有效改善了汽車在高速情況下的道路操控性，它展示了當今低截面輪胎的最初形狀；1938年，米其林將橡膠和鋼絲完美地結合，成功設計了鋼絲輪胎，改良了輪胎的抗熱和熱載荷能力，也朝著子午線輪胎的發展邁出了重要的一步。 經歷過30年代的飛速發展後，第二次世界大戰又把米其林帶進了有史以來最為灰暗動盪的歲月。毀滅性的殘酷戰爭、愛德華·米其林的去世，重大打擊接連不斷，但這些都不能阻擋米其林發展的腳步。戰爭期間，面對原材料的短缺，米其林在保證軍需品供應的同時，還秘密地進行著放射結構輪胎的研究工作，為戰後子午線輪胎的開發奠定了基礎。 經過多年不懈的努力，在．1946年，改變世界輪胎工業、舉世聞名的子午線輪胎終於在米其林的工廠中「出生」了，這種當時被稱作「x」型，利用鋼絲簾布層鞏固結構的輪胎於1949年正式推向市場，從此，又一次輪胎的技術革命爆發了。子午線輪胎一經面世，就很快占據整個市場，被幾乎所有類型的汽車使用。它大幅度提升了輪胎的各種特性：使用壽命更長，駕駛變得更舒適、安全，操控性愈加完美，另外，節省燃油也是其不容忽視的優點。這些都成為之後30年米其林在輪胎業中獨領風騷的決定性優勢，也令其他同行望其項背。 子午線輪胎似乎敲開了輪胎高科技的大門，從50年代至今，原始的子午線輪胎不斷演變進化，不斷推陳出新：1959年，推出「x」型無內胎卡車及公共汽車輪胎，以高速持續行駛而不聚熱見稱；1965年，米其林製造出胎冠具有不對稱花紋的XAS型輪胎，同時，子午線輪胎也被第一次用到了越野車上。為了滿足賽車者日益增加的要求，米其林開始生產一系列比賽用和越野賽用的子午線輪胎；1968年，新型VR輪胎能使車速達到240公里／小時，極限速度甚至超過300公里／小時，安全和舒適性同樣十分出色；1976年，TRX輪胎的發明，標志著子午線輪胎發展的里程碑，由於其與輪輞新的配合形式，加大了胎壁的變形區，性能大為改進；1980年，米其林發明了供摩托車用的BIB TS型輪胎，既而又發展成從125cc到最大排量的摩托車系列輪胎，1985年，推出M系列轎車輪胎，並將其一直發展演進至今，米其林也逐漸成為世界第一。
賓士在賽道上
在上個世紀末的法國，有一位騎師設想將不同國家的優秀賽車選手集中起來，組織一項機動車賽事，並向法國汽車俱樂部建議把他們自己賽馬協會使用的格林披治大賽標志用於汽車比賽。他的想法被採納了，之後的8次比賽都使用了這個名字。盡管如此，事實告訴人們，只有1906年ACF大獎賽才能稱得上真正意義的第一次格林披治汽車比賽。 賽程超過1200公里的格林披治大賽是對輪胎製造商的真正挑戰，米其林以其嶄新的技術為賽手們提供了一次嘗試的機會，讓他們使用一種新型的可拆卸輪輞，它可令輪胎在破裂後容易更換，要知道，在當時，對於如此長距離的泥濘賽道，爆胎是經常發生的。共有34輛汽車參加了1906年的賽事，米其林和它的可拆卸輪輞正在接受實地的考驗：車手弗朗索瓦只用3分鍾便更換了損壞的輪胎，以超過101公里／時的平均速度最終折桂。比賽結束後，人們驚奇地發現，在跑完全程的11輛賽車中有5輛裝備了米其林輪胎。這就是早期的格林披治大賽，米其林輝煌的運動生涯就此開始了。 百餘年的歷程，米其林始終風馳電掣地疾駛於賽道上。今天，在米其林的競賽部，每星期7天，每天24小時，150人為賽手和車隊不停地工作著；每年組織規劃220次試驗，向世界各地運送2400噸輪胎……。談到成績，回首20世紀的最後25年，有超過120名車手和生產商世界錦標得主乘著米其林輪胎高奏凱歌，其中包括82次摩托車賽(公路和越野賽)，總共13屆世界越野車大賽車手和車隊冠軍，以及過去13年巴黎—達喀爾拉力賽各組別的冠軍。除此以外，更值得一提的是米其林也曾在凝聚世界最高科技，最為車迷們心痴神往的F1賽事中鋒芒一時：1977—1984年8個賽季中，米其林分享了59次分站冠軍，三屆車手和兩屆車隊世界冠軍，輪胎人必比登使得米其林在F1賽場上名聲顯赫。在達到顛峰，即車手尼基·勞德為米其林帶來其第三個(也是最後一個)錦標賽冠軍後，米其林公司宣布退出F1大賽(但卻沒有放棄其他形式的兩輪和四輪賽車運動)，隨後便是十幾年漫長的等待與觀望，米其林曾一度認為F1大賽不會長久，可時間證明這一汽車賽事中的頂級項目經過改頭換面，已越發受人矚目，生機勃勃，它也逐漸成為企業展示實力，將產品推向市場的窗口。所有這一切都使米其林再次找回重新踏上F1賽場的信心和理由。1999年，米其林作出正式決定，並很快付諸於行動，與寶馬一威廉姆斯和美洲虎車隊達成2001年的協議。一切就好像100年前一樣，米其林將繼續在極富挑戰的賽場上極盡施展它的魔力。
放眼未來
由可拆換輪胎發展至最新的「胎唇垂直錨泊」輪胎(PAX系統)，米其林的產品已經遍及許多領域，無論是汽車，或是工程、農業機械、懸掛系統，甚至是航天領域，米其林的技術無所不在。全球每一個國度的任何一種汽車，包括古董車、輕型客車、豪華轎車、四輪驅動越野車、各種級別的卡車……，都裝備了其全天候輪胎或是雪地輪胎，米其林足跡已跑遍全球。 在米其林產品的不同發展階段，乃至未來，環保與節能從沒被忽略過，苛求更長的使用壽命，降低耗油量，削減噪音，廢舊輪胎的循環再用。自1946年子午線輪胎的發明，米其林已經節省了30％的原料；1992年問世的「環保」輪胎和新的生產程序則節省了60％的能源。 更高的安全水準，更舒適的乘坐，更多元化的服務……；更低的能耗，更少的環境憂慮……。長期在一些方面追求更多，在另一些方面追求更少，推動交通運輸發展至更遼遠的境界，這是米其林的境界!
③ 如何閱讀質粒圖譜檔 詳細�0�3
一、一個合格質粒的組成要素 復制起始位點Ori，即控制復制起始的位點。原核生物DNA 分子中只有一個復制起始點。而真核生物DNA 分子有多個復制起始位點。 抗生素抗性基因：可以便於加以檢測，如Amp+ ，Kan+ 多l 克隆位點：MCS 克隆攜帶外源基因片段 P/E：啟動子/增強子 Terms：終止信號 加poly（A）信號：可以起到穩定mRNA 作用 二、如何閱讀質粒圖譜 第一步：首先看Ori 的位置，了解質粒的類型（原核/真核/穿梭質粒） Ori 的箭頭指復制方向，其他元件標注的箭頭多指轉錄方向（正向）。 第二步：再看篩選標記，如抗性，決定使用什麼篩選標記： （1）Ampr：水解β -內醯胺環，解除氨苄的毒性。 （2）tetr ：可以阻止四環素進入細胞。 （3）camr：生成氯黴素羥乙醯基衍生物，使之失去毒性。 （4）neor（kanr）：氨基糖苷磷酸轉移酶，使G418（卡那黴素衍生物）失活。 （5）hygr：使潮黴素β 失活。 第三步：看多克隆位點（MCS）。它具有多個限制酶的單一切點，便於外源基因的插入。如果在這些位點外有外源基因的插入，會導致某種標志基因的失活，而便於篩選。決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步：再看外源 DNA 插入片段大小。質粒一般只能容納小於10Kb 的外源DNA 片段。一般來說，外源DNA 片段越長，越難插入，越不穩定，轉化效率越低。 第五步：是否含有表達系統元件，即啟動子－核糖體結合位點－克隆位點－轉錄終止信號。這是用來區別克隆載體與表達載體。克隆載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用那種載體，還是要以實驗目的為准繩。 相關概念： 啟動子－核糖體結合位點－克隆位點－轉錄終止信號 啟動子－促進DNA 轉錄的DNA 順序，這個DNA 區域常在基因或操縱子編碼順序的上游，是DNA 分子上可以與RNApol 特異性結合並使之開始轉錄的部位，但啟動子本身不被轉錄。 增強子/沉默子－為真核 l 基因組（包括真核病毒基因組）中的一種具有增強鄰近基因轉錄過程的調控順序。其作用與增強子所在的位置或方向無關。即在所調控基因上游或下游均可發揮作用。沉默子－負增強子，負調控序列。 核糖體結合位點/起始密碼/SD 序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA 有核糖體的兩個結合位點，對於原核而言是AUG（起始密碼）和SD 序列。 l 轉錄終止順序（終止子）/翻譯終止密碼子：結構基因的最後一個外顯子中有一個 AATAAA 的保守序列，此位點 down－stream 有一段 GT 或 T 富豐區，這2部分共同構成 poly （A）加尾信號。結構基因的最後一個外顯子中有一個 AATAAA 的保守序列，此位點 down－ stream 有一段GT 或T 富豐區，這2部分共同構成poly（A）加尾信號。 三、載體及其分類 載體：即要把一個有用的基因（目的基因——研究或應用基因）通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞，這種運載工具就叫做載體（vector）。 P.S.基因工程所用的vector 實際上是DNA 分子，是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的DNA。 載體的分類 按功能分成：（1）克隆載體：都有一個鬆弛的復制子，能帶動外源基因，在宿主細胞中復制擴增。它是用來克隆和擴增DNA 片段（基因）的載體。（所以有時實驗時擴增效率低下，要注意是不是使用的嚴謹型載體）（2）表達載體：具有克隆載體的基本元件（ori,Ampr,Mcs 等）還具有轉錄/翻譯所必需的DNA 順序的載體。 按進入受體細胞類型分：（1）原核載體（2）真核載體（3）穿梭載體（sbuttle vector）指在兩種宿主生物體內復制的載體分子，因而可以運載目的基因（穿梭往返兩種生物之間）。 P.S. 穿梭質粒含原核和真核生物2個復制子，以確保兩類細胞中都能擴增。 基因工程載體的3個特點： （一）都能獨立自主的復制：載體DNA 分子中有一段不影響它們擴增的非必需區域，如 MCS，插在其中的外源DNA 片段，能被動的跟著載體一起復制/擴增，就像載體的正常成分一樣。 （二）都能便利的加以檢測： 如載體的葯物抗性基因，多是抗生素抗性基因，將受體細胞放在含有該抗生素培養板上培養生長時，只有攜帶這些抗性基因的載體分子的受體細胞才能存活。 （三）都能容易進入宿主細胞中去，也易從宿主細胞中分離純化出來。 四、載體的選擇和制備 選擇載體主要依據構建的目的，同時要考慮載體中應有合適的限制酶切位點。如果構建的目的是要表達一個特定的基因，則要選擇合適的表達載體。 載體選擇主要考慮下述3點： 1、 構建DNA 重組體的目的，克隆擴增/表達表達，選擇合適的克隆載體/表達載體。 2、載體的類型： （1）克隆載體的克隆能力－據克隆片段大小（大選大，小選小）。如小於10kb 選質粒。 （2）表達載體據受體細胞類型－原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳類細胞表達載體。 （3）對原核表達載體應該注意3點： ①選擇合適的啟動子及相應的受體菌； ②用於表達真核蛋白質時注意克服4個困難和閱讀框錯位； ③表達天然蛋白質或融合蛋白作為相應載體的參考。 3、載體 MCS 中的酶切位點數與組成方向因載體不同而異，適應目的基因與載體易於鏈接，不產生閱讀框架錯位。選用質粒（最常用）做載體的4點要求： ①選分子量小的質粒，即小載體（1－1.5kb）→不易損壞，在細菌裡面拷貝數也多（也有大載體）； ②一般使用鬆弛型質粒在細菌里擴增不受約束，一般10個以上的拷貝，而嚴謹型質粒小於10個。 ③必需具備一個以上的酶切位點，有選擇的餘地； ④必需有易檢測的標記，多是抗生素的抗性基因，不特指多位Ampr（試一試）。 無論選用哪種載體，首先都要獲得載體分子，然後採用適當的限制酶將載體DNA 進行切 割，獲得分子，以便於與目的基因片段進行連接。 二、pET32a(+)自身載體表達的片段大小 The expected fusion protein expressed encoded by just the pET-32a(+) vector alone would be around 20.4 kDa. The Trx-tag by itself would contribute 12kDa. The rest is e to the two His-tags (0.8kDa each) and the S-tag (1.7kDa). The remaining 5.1kDa is e to the intervening（?） 54 amino acids between the tags and until the stop codon. 三、pET32系列載體的載體序列地址 四、pET 系列載體閱讀方法 ori 是復制起始點，細的黑箭頭是幾個不同的轉錄區，其箭頭方向不同，說明每個表達產物（如kan 抗性基因、LacI 等）都有獨立的promoter，有時與T7 promoter 方向相反。粗的黑箭頭是MCS，用於目的基因的插入，箭頭方向表明目的基因的轉錄方向，它的轉錄方向可以與其它幾個不同的轉錄區相同，也可以不同，如 Kan 抗性基因、LacI 的方向是一樣的，可能與調控相關，不同的載體是不一樣的。一個載體可只看它的啟動子到終止子那一段，其它的可以考慮少些。 五、pET 表達菌株的相關信息 （ DE3 ）指宿主為 λ DE3 溶原菌，其染色體上帶有一拷貝由 lacUV5 啟動子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。這類菌株適用於從克隆到 pET 載體的目標基因生產蛋白。命名為 pLysS 和 pLysE 的宿主菌帶有編碼 T7 溶菌酶（為 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物）的 pET 相容性質粒。帶有 pLysS 的細胞產生少量溶菌酶，而 pLysE 宿主菌產生更大量酶。這些菌株用於在誘導前抑制 T7 RNA 聚合酶的基礎表達，這樣可以穩定編碼影響細胞生長和活力的目標蛋白的 pET 重組體。帶有 pLacI 的宿主菌產生額外的抑制 pETBlue 和 pTriEx 載體基礎表達的 lac 阻遏蛋白。 λ DE3 溶原化試劑盒用於制備其它遺傳背景的新表達宿主菌。 AD494 菌株為硫氧還蛋白還原酶 ( trxB ) 突變菌株，能夠在胞漿內形成二硫鍵，提供了生產正確折迭的活性蛋白的潛力。 TrxB 突變可用卡那黴素選擇，因此該菌株建議用於帶氨苄抗性標記 bla 的質粒。 B834 為 BL21 的親本菌株。這些蛋白酶缺陷宿主菌為甲硫氨酸營養缺陷型，可用 35 S- 甲硫氨酸和硒代甲硫氨酸對目標蛋白進行高特異活性標記，從而用於結晶學研究。 BL21 應用最廣的宿主菌來源，具有 lon 和 ompT 蛋白酶缺陷的優點。 BL21 TrxB 菌株在蛋白酶缺陷 BL21 背景上具有與 AD494 菌株相同的硫氧還蛋白還原酶突變 ( trxB ) 。由於 trxB 宿主有利於胞漿內二硫鍵形成，它們的使用可增加正確折迭的蛋白組分。 TrxB 突變可用卡那黴素選擇，因此該菌株建議用於帶氨苄抗性標記 bla 的質粒。 BLR 為 BL21 的 recA - 衍生菌株，能夠改善質粒單體產量，有助於穩定含有重復序列或其產物能夠引起 DE3 噬菌體丟失的目標質粒。 HMS174 菌株在 K-12 背景上提供了 recA 突變。與 BLR 一樣，這些菌株能夠穩定其產物能夠引起 DE3 噬菌體丟失的某些目標基因。 NovaBlue 適合 用作初始克隆宿主菌的 K-12 菌株，具有高轉化效率、藍 / 白斑篩選能力（與合適質粒）和導致優質質粒 DNA 高產的 recA endA 突變。由於存在 F 附加體編碼的 lacI q 阻遏蛋白， NovaBlue 的 DE3 溶原菌是一個非常有用的嚴緊型宿主菌。 Origami 為 K-12 衍生的宿主菌，硫氧還蛋白還原酶突變 ( trxB ) 和谷胱甘肽還原酶 ( gor ) 基因均為突變，能夠大大增強胞漿內二硫鍵的形成。研究表明即使總體表達水平相似， Origami （ DE3 ）表達的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌與氨苄抗性質粒相容，可用於 pET-32 載體，硫氧還蛋白標簽能夠進一步增強在胞漿內形成二硫鍵。 TrxB 和 gor 突變可分別用卡那黴素和四環素選擇，因此該菌株建議用於帶氨苄抗性標記 bla 的 pET 質粒。 Origami B 宿主菌來源於 BL21 lacZY 突變株，還帶有與原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突變。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner 和 Origami 宿主菌的優點於一體。 TrxB 和 gor 突變可分別用卡那黴素和四環素選擇，因此該菌株建議用於帶氨苄抗性標記 bla 的 pET 質粒。 Rosetta 宿主菌從 BL21 衍生而來，可增強帶有大腸桿菌稀有密碼子的真核蛋白的表達。該菌株通過一個相容性氯黴素抗性質粒補充密碼子 AUA 、 AGG 、 AGA 、 CUA 、 CCC 和 GGA 的 tRNAs 。這樣 Rosetta 菌株提供了「萬能」的翻譯，從而避免因大腸桿菌密碼子使用頻率導致的表達限制。 tRNA 基因由它們的天然啟動子驅動。在 Rosetta （ DE3 ） pLysS 和 Rosetta （ DE3 ） pLacI 中，稀有 tRNA 基因存在於分別帶有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一質粒上。 Tuner 菌株為 BL21 的 lacZY 缺失突變株，能夠調整培養物中所有細胞的蛋白表達水平。 lac 通透酶（ lacY ）突變使得 IPTG 均勻進入群體所有細胞，從而具有濃度依賴、水平均一的誘導表達。通過調整 IPTG 濃度，表達可從極低水平調節到極強、完全誘導的表達水平（通常與 pET 載體相關）。低水平表達有時可能增強難表達蛋白的溶解性和活性。 Tuner （ DE3 ） pLacI 菌株與 pETBlue 和 pTriEx 載體的表達相容。 詳情可咨詢生物淘
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《速度瞎褲盯與激情9》
導演: 林詣彬
編劇: 丹·凱西、蓋瑞·斯科特·湯普森
主磨和演: 范·迪塞爾、純蘆約翰·塞納、米歇爾·羅德里格茲、喬丹娜·布魯斯特、泰瑞斯·吉布森、盧達·克里斯、查理茲·塞隆、海倫·米倫、姜成鎬、娜塔莉·伊曼紐爾、邁克爾·魯克、盧卡斯·布萊克、杜俊緯、卡迪·B、吉姆·帕拉克、芬恩·科爾、安珀·西耶娜、馬丁·福特、艾拉·沃克、澤井杏奈、圖厄·埃爾斯特德·拉斯姆森、米拉吉·格爾比克、吉米·斯達、萊克斯·艾爾、溫尼·貝內特、馬克·克雷尼克、傑森·斯坦森
類型: 動作、犯罪
製片國家/地區: 美國
語言: 英語
上映日期: 2021-05-21(中國大陸)、2021-05-19(韓國)、2021-06-25(美國)
片長: 142分鍾(中國大陸)、145分鍾、150(導演剪輯版)
又名: F9狂野時速(港)、玩命關頭9(台)、狂野時速9、速激9、FF9、Fast & Furious 9
「唐老大」多姆·托萊多（范·迪塞爾 飾）與萊蒂（米歇爾·羅德里格茲 飾）和他的兒子小布萊恩，過上了遠離紛擾的平靜生活。然而他們也知道，安寧之下總潛藏著危機。這一次，為了保護他所愛的人，唐老大不得不直面過去。他和夥伴們面臨的是一場足以引起世界動盪的陰謀，以及一個前所未遇的一流殺手和高能車手。而這個名叫雅各布（約翰·塞納 飾）的人，恰巧是多姆遺落在外的親弟弟。
⑤ 速度與激情5 百度雲 分享
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《速度與激情5》是由林詣彬執導的犯罪動作類電影，是速度與激情系列的第五部。范·迪塞爾、保羅·沃克、喬丹娜·布魯斯特慶核渣、泰瑞譽悄氏頃斯·吉布森、盧達·克里斯、馬特·斯查爾茲、成康、道恩·強森主演。該片於2011年4月29日在美國上映，2011年5月12日在中國上映。該片講述了兩位男主角多米尼克與布萊恩被一位傳奇警官追捕，不得不逃亡，為了讓自己徹底獲得自由，決定干最後一票的故事。
⑥ jst是什麼幣
JST幣是去中心化金融系統JUST的生態治理代幣，根據波場TRON建立，發行於2020年5月，總量為9900000000。JST幣是USDJ貨幣體系的一部分，USDJ是一個與美元1:1錨定的穩定幣。波場（TRON）是全球最大的區塊鏈去中心化應用操作系統。
區塊鏈是一個分布式的共享賬本和資料庫，具有「不可偽造」「全程留痕」「可以追溯」「公開透明」「集體維護」等特徵。涉及數學、密碼學、互聯網和計算機編程等很多科學技術問題。
拓展資料
1、JUST系統的目標是建立一個公平的去中心化金融系統，為全球所有用戶提供穩定幣借貸和治理機制。這是雙代幣系統。首先是USDJ，這是一個與美元1:1錨定的穩定幣，通過在JUST的CDP借貸平台抵押TRX生成。其次是JST幣，它是USDJ貨幣體系的一部分。
2、JUST的系統治理，主要依賴JST幣的持有者。一方面JST幣持有者可享受由USDJ的穩定費用帶來的收益，另一方面JST幣持有者也需要同時承擔起JUST系統的治理職能。JUST平台的治理，主要是通過JST幣持有者通過投票選舉出有效提案來完成。每一個JST幣持有者，可以通過JST幣投票的形式，從所有的修改系統參數的智能合約中，選出自己支持的合約，投票完成後，獲得最高票數支持的合約即為有效提案，有效提案合約可以獲得系統許可權，按照既定邏輯完成JUST系統內部管理變數的修改。
3、JST幣創始團隊及其背景：JST幣擁有一支富有朝氣的精英團隊。技術團隊中50%的員工來自阿里巴巴、騰訊、IBM等世界一線互聯網公司，擁有豐富的產品設計、開發經驗。JUST系統的金融分析團隊來自數個全球投行，運營團隊具有資深區塊鏈運營經驗。同時JUST系統也是波場TRON生態的鐵桿支持者