trx標簽純化
發布時間: 2025-09-20 20:34:49
① pet32a切除標簽
這個我剛好做過,用腸激酶切除~~用Ni-NTA鎳柱純化,你給我個郵箱,方法我發給你
② pET-32a(+)質粒載體信息
pET32a質粒載體是一種設計用於克隆構建和高水平融合表達帶109個氨基酸Trx標簽的蛋白質序列的載體。以下是關於pET32a質粒載體的詳細信息:
融合表達:通過將目的基因插入到pET32a載體的多克隆位點,可以實現目的基因與Trx標簽的融合表達。融合蛋白包含His和S標簽,這些標簽有助於蛋白質的檢測和純化。
標簽特性:Trx標簽是一個小分子、高度可溶的蛋白質標簽,它有助於增加融合蛋白的穩定性和溶解度。His標簽則用於鎳離子親和層析等純化方法。
啟動子與表達:pET32a載體使用T7 RNA聚合酶啟動子來驅動目的基因的表達。在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒粒子能夠產生並啟動高效蛋白表達。
終止子:載體中包含終止子序列,用於終止蛋白翻譯,確保表達的蛋白具有正確的C端序列。
復制子:pET32a載體的F1復制子確保其在大腸桿菌等宿主細胞中的穩定復制。
序列信息:載體的序列提供了關於其結構和功能的詳細信息,包括啟動子、終止子、多克隆位點和復制子等關鍵元素。這些序列信息對於理解和操作載體至關重要。
參考資源:對於更詳細的質粒載體信息查詢,可以訪問如addgene.org等網站,這些網站提供了豐富的質粒載體信息和資源。
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