ptigtrx載體表達的圖
Ⅰ 質粒圖譜怎麼看
1.第一步，看箭頭：
大多數質粒都會有箭頭，箭頭有兩種解釋。一種是轉錄方向，轉錄方向主要是由啟動子開始的一個大箭頭，是啟動子啟動序列的順序。另一種是復制起始位點的方向，復制起始位點就是該質粒在大腸桿菌等細菌或真菌中DNA復制的一個方向。
還需要提到的是F1啟動子（圖上的f1 ori）代表的是噬菌體的復制起始方向，只能復制出單鏈的DNA哦，但是可以用來測序。看懂轉錄的方向，這樣就方便設計插入片段的位置和方向性。
2.第二步，看上面的標簽。
報告基因：通常會有一兩個蛋白，被用作報告基因，比如常見的copGFP（綠色熒光蛋白），Puro（嘌呤黴素），Lacz（乳糖操縱子）等等。和抗性基因不同，這樣的報告基因，並不是為了在大腸桿菌擴增質粒的過程中起作用的。
而是在質粒轉入表達體系後起到作用的，基本上就是為了顯示過表達或是敲減的基因是否正常運作。有的報告基因會融合在蛋白中表達，有的會另外用一個獨立的啟動子進行表達（比如shRNA的質粒中）。
3.第三步，看多克隆位點：
MCS（Multiple Cloning Site，也就是多克隆位點），一般圖中會把多克隆位點上的酶切位點都標記出來。上面的酶切位點順序，一般都是按照5`-3`的順序排列下來的，需要注意的是這樣幾點。
第一點是要注意，酶切位點邊標注了*的一般是指並不僅僅存在一個位點，也就不能用來作為構建質粒的酶切位點。
第二點需要注意的是，有的酶切位點，在序列中只有一個，但它上面也會標注一個*或者（dam），這說明可能這個酶切位點會有CpG島的甲基化修飾[常見的是XbaI，TCTAG(6m)A中的TC無法切開]，一般也是不能用的。但是非要用這個酶切位點的話，就需要用非甲基化的感受態細胞，如JM109或者JM110。
4.第四步，看多克隆位點的序列：
末端如果有差異的話，可以把基因的ATG（甲硫氨酸）的5`末端替換1-2個鹼基（變成GTG或者GCG這樣），從第二個氨基酸序列開始完全一致即可。而配合擴增和酶切的話，插入片段是允許有3`末端的冗餘。
為了可以應付3`末端的冗餘鹼基，在多克隆位點序列後，會有解碼的終止TAA密碼，即使插入的片段使得3`末端產生了移碼突變，照樣能使表達的蛋白正常終止掉（在酵母雙雜的AD質粒中，由於插入的是隨機cDNA，所以AD的載體上會常見這樣的結構）。
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分類
1.根據質粒能否通過細菌的接合作用，可分為接合性質粒和非接合性質粒。
接合性質粒帶有與接合傳遞有關的基因。非接合質粒在一定條件下通過與其共存的接合質粒的誘動或轉導而傳遞。
2.根據質粒在細菌內的復制類型可分為兩類：嚴緊控制型和鬆弛控制型。
嚴緊控制復制型質粒的復制酶系與染色體DNA復制共用，只能在細胞周期的一定階段進行復制，當細胞染色體停止復制時，質粒也就不再復制。
鬆弛控制復制型的質粒的復制酶系不受染色體DNA復制酶系的影響，在整個細胞生長周期中隨時都可以復制，在染色體復制已經停止時質粒仍能繼續復制。
3.根據質粒的不相容性，可分為不相容性和相容性。
不相容性指結構相似、密切相關的質粒不能穩定地共存於同一宿主細菌內的現象，反之為相容性。常用於流行病學的調查。
Ⅱ 基因表達載體模式圖上面的復制原點是干什麼的
ori區控制這個質粒可以在那類生物中復制。
比如穿梭載體，要有兩個ori區，使其分別能在細菌、膿桿菌中復制。
Ⅲ pTIG-TRX質粒上有信號肽的基因序列嗎
信號肽一定是包含於CDS之中的。你如果知道cDNA序列，那麼去ORF finder找出CDS，然後把CDS翻譯為氨基酸序列，提交到信號肽預測程序SignalP，或者AnthePro里預測就行。
Ⅳ （2008海南）圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為
（1）由於含有目的基因的DNA片段和質粒上均含有EcoRI酶的切割位點，所以用此酶切割後產生相同的黏性末端．這樣，具有相同黏性末端的片段用DNA連接酶均可連接，從而產生3種連接產物，目的基因-載體連接物、載體-載體連接物、目的基因-目的基因連接物，所以要進行分離純化．
（2）由於將細胞放入含四環素的培養基，要將存活tctR 為四環素抗性基因結構要保持完整，用EcoRI酶切後再用連接酶連接的三種產物只有載體-載體連接物基因結構保持完整．
（3）防止目的基因和基因和質粒表達載體在酶切後產生的末端發生任意連接，需要有兩種限制酶，而ampR為青黴素抗性基因，P啟動子，T為終止子，ori為復制原點，結構不能被破壞，故選擇EcoRⅠ和BamHⅠ這兩種限制酶．
故答案為：
（1）目的基因-載體連接物載體-載體連接物目的基因-目的基因連接物分離純化
（2）載體-載體連接物
（3）EcoRⅠ和BamHⅠ