trx標簽蛋白酶切後易沉澱

① 蛋白質溶液加熱煮沸為什麼能引起蛋白質沉澱

蛋白質變性，形成溶質微粒大於100納米的粘結塊

② 帶有trx標簽會不會影響蛋白的抗原性

有可能的
trx標簽是比較大的融合標簽，有20多KDa
非常有可能改變蛋白的抗原決定簇
一般為了不影響蛋白的功能，會在trx標簽和目標蛋白之間加一個酶切位點，比如腸激酶的位點DDDDK，把trx標簽去除掉

③ 為什麼說「變性的蛋白質一定沉澱」這句話是錯的

天然蛋白質分子受到某些物理因素如熱、紫外線照射、高壓和表面張力等或化學因扮槐素如有機溶劑、酸鹼等的影響時，生物活性喪失，溶解度降低，不對稱性增高以及其他的物理化學常數發生改變，這種過程稱為蛋白質變性。蛋白質變性後，會引起一些物理化學性質的改變，疏水基外廳緩友露，溶解度降低，一般在等電點區域不溶解，分子相互凝集，形成沉澱。但在鹼性溶液中，或有尿素、鹽酸胍等變性劑存在時，仍保持溶解狀態，透析除去這些變性劑時，又可哪銀沉澱出來。

④ 酶切後沉澱的方法

最好是採用切膠回收，使用膠回收試劑盒很方便的。
如果沒有試劑盒也可以用等體積酚氯仿抽提，再加頃手入十分之一鏈圓體積3M
NaAc（pH5.2），2.5倍體棚乎塌積無水乙醇，－20度沉澱過夜，12000rmp離心後用70％乙醇洗滌後加TE溶解。

⑤ GST標簽蛋白的純化，目的蛋白在GST標簽切除後的濃縮、純化（離子交換和分子篩）過程中出現了聚集和降解。

肯定是很純了再切除啊，加gst標簽的目的就是為了純化。純化後切除，然後再純化一次就行了。你是蛋白酶把目的蛋白也切了吧？不然怎談襪么喊侍橋會變性呢？檢鄭猛查一下蛋白酶切位點