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trx标签纯化

发布时间: 2025-09-20 20:34:49

① pet32a切除标签

这个我刚好做过,用肠激酶切除~~用Ni-NTA镍柱纯化,你给我个邮箱,方法我发给你

② pET-32a(+)质粒载体信息

pET32a质粒载体是一种设计用于克隆构建和高水平融合表达带109个氨基酸Trx标签的蛋白质序列的载体。以下是关于pET32a质粒载体的详细信息:

  1. 融合表达:通过将目的基因插入到pET32a载体的多克隆位点,可以实现目的基因与Trx标签的融合表达。融合蛋白包含His和S标签,这些标签有助于蛋白质的检测和纯化。

  2. 标签特性:Trx标签是一个小分子、高度可溶的蛋白质标签,它有助于增加融合蛋白的稳定性和溶解度。His标签则用于镍离子亲和层析等纯化方法。

  3. 启动子与表达:pET32a载体使用T7 RNA聚合酶启动子来驱动目的基因的表达。在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生并启动高效蛋白表达。

  4. 终止子:载体中包含终止子序列,用于终止蛋白翻译,确保表达的蛋白具有正确的C端序列。

  5. 复制子:pET32a载体的F1复制子确保其在大肠杆菌等宿主细胞中的稳定复制。

  6. 序列信息:载体的序列提供了关于其结构和功能的详细信息,包括启动子、终止子、多克隆位点和复制子等关键元素。这些序列信息对于理解和操作载体至关重要。

  7. 参考资源:对于更详细的质粒载体信息查询,可以访问如addgene.org等网站,这些网站提供了丰富的质粒载体信息和资源。

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