trx蛋白纯化标签

① 如何用pcr在表达蛋白时添加上标签

表达蛋白的方法，非常多。根据亲和纯化的反应类型和介质分，有单纯的亲和纯化，还有共价亲和纯化（针对蛋白质游离的－NH2、－SH、-COOH或－生物素标签）、；根据蛋白质的功能分：免疫沉淀法纯化、免疫共沉淀法分离；根据表达蛋白所带标签，分为GST-、polyHis-和生物素；以及其他比较特殊的蛋白质分离方法，例如：磁珠式分离、磷酸化蛋白分离、含Met或Trp蛋白质或多肽的分离方案.

② 我想要加一个标签便于蛋白的纯化，加完标签之后想要用真核表达蛋白，应该加什么标签啊

理论上，都是可以用于真核表达的，这些标签只要不会影响蛋白本身活性就没有任何问题。给你举个离子，在植物转基因中，就有一经典方法检测蛋白表达情况的，就是在蛋白后面带上his tag，然后待转基因植株出来后，就用抗his taq的抗体（商用的，有卖）做western或者ELISA去检测和定量转入的蛋白。这种方法尤其在过表达本身来自于植物的内源蛋白中非常有用。

③ MBP标签的融合蛋白纯化原理

麦芽糖结合蛋白与亲和填料结合了，当存在高浓度的麦芽糖的时候，麦芽糖会和麦芽糖结合蛋白相互竞争亲和填料，麦芽糖结合蛋白肯定竞争不过，就被洗脱下来了。

④ 带表位标签Flag的重组蛋白请问怎么纯化

一般用FLAG标签抗体偶联介质或者磁珠进行蛋白的纯化。

⑤ TRX标签蛋白怎么纯化

一般这个载体中都会有His 标签，直接用镍柱纯化即可

⑥ 纯化蛋白tag标签最好加在哪端

看你的蛋白哪端具有主要功能，然后加在另一端

⑦ pet32a切除标签

这个我刚好做过，用肠激酶切除~~用Ni-NTA镍柱纯化，你给我个邮箱，方法我发给你

⑧ 带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性

有可能的
trx标签是比较大的融合标签，有20多KDa
非常有可能改变蛋白的抗原决定簇
一般为了不影响蛋白的功能，会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点，比如肠激酶的位点DDDDK，把trx标签去除掉

⑨ 如何使用纯化标签获得在大肠杆菌中的表达的蛋白

根据不同的纯化标签对应的亲和层析色谱可以分离出表达的目的蛋白

亲和色谱是将与某一组蛋白对应的特异性配基结合到色谱基质上，蛋白质因为有纯化标签可以与其特异性的配基结合，并且这种结合是可逆的。这样可以很轻松提取分离出表达的目的蛋白。

下图是一些可以特异性结合的配基

⑩ His镍柱标签蛋白纯化用什么填料比较好

上海生工有NI-NTA树脂卖，产品货号
BSP033-2，可以用于His镍柱标签蛋白纯化