pet32a载体trx标签免疫原
⑴ pet32的促溶标签多大
pet32的促溶标签32X19mm。
尺寸：宽32*高19MM)左下角白色小标签为本产品目前市面上的液晶屏幕保护贴，通透度达99%。
pET-32C质粒是一个大肠杆菌表达载体，T7启动子驱动TrxA促溶标签和目的蛋白融合表达，PET具有较好硬脆性,可以耐一定的高温,抵御恶劣的环境,防酸碱等化学品的腐蚀,非常适用于户外和较高品质要求的标签。
⑵ 用pET-32a表达含起始密码子的目的蛋白时，翻译是从载体上的起始密码子开始还是从目的蛋白上的开始
当然是从载体上已有的融合蛋白开始，你的目的蛋白是在Trx和His-tag后面的
⑶ pet-32a空载体是可溶性表达吗
该空载体紧紧会表达一段Trx标签蛋白，加上his标签，约20kd左右，是高度可溶的。
⑷ 用pet-32a做载体，自己本身的序列有44kda，表达的蛋白应该多大
用pet-32a做载体，自己本身的序列有44kda，表达的蛋白应该多大
1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株，噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株，构建好的表达载体可以直接转入表达菌株中，诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是iptg诱导。
2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因，T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子，lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达;
3)表达质粒如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏蛋白lacI的基因，在插入目的基因后，lacI是失活的;
⑸ 质粒图谱怎么看
1.第一步，看箭头：
大多数质粒都会有箭头，箭头有两种解释。一种是转录方向，转录方向主要是由启动子开始的一个大箭头，是启动子启动序列的顺序。另一种是复制起始位点的方向，复制起始位点就是该质粒在大肠杆菌等细菌或真菌中DNA复制的一个方向。
还需要提到的是F1启动子（图上的f1 ori）代表的是噬菌体的复制起始方向，只能复制出单链的DNA哦，但是可以用来测序。看懂转录的方向，这样就方便设计插入片段的位置和方向性。
2.第二步，看上面的标签。
报告基因：通常会有一两个蛋白，被用作报告基因，比如常见的copGFP（绿色荧光蛋白），Puro（嘌呤霉素），Lacz（乳糖操纵子）等等。和抗性基因不同，这样的报告基因，并不是为了在大肠杆菌扩增质粒的过程中起作用的。
而是在质粒转入表达体系后起到作用的，基本上就是为了显示过表达或是敲减的基因是否正常运作。有的报告基因会融合在蛋白中表达，有的会另外用一个独立的启动子进行表达（比如shRNA的质粒中）。
3.第三步，看多克隆位点：
MCS（Multiple Cloning Site，也就是多克隆位点），一般图中会把多克隆位点上的酶切位点都标记出来。上面的酶切位点顺序，一般都是按照5`-3`的顺序排列下来的，需要注意的是这样几点。
第一点是要注意，酶切位点边标注了*的一般是指并不仅仅存在一个位点，也就不能用来作为构建质粒的酶切位点。
第二点需要注意的是，有的酶切位点，在序列中只有一个，但它上面也会标注一个*或者（dam），这说明可能这个酶切位点会有CpG岛的甲基化修饰[常见的是XbaI，TCTAG(6m)A中的TC无法切开]，一般也是不能用的。但是非要用这个酶切位点的话，就需要用非甲基化的感受态细胞，如JM109或者JM110。
4.第四步，看多克隆位点的序列：
末端如果有差异的话，可以把基因的ATG（甲硫氨酸）的5`末端替换1-2个碱基（变成GTG或者GCG这样），从第二个氨基酸序列开始完全一致即可。而配合扩增和酶切的话，插入片段是允许有3`末端的冗余。
为了可以应付3`末端的冗余碱基，在多克隆位点序列后，会有译码的终止TAA密码，即使插入的片段使得3`末端产生了移码突变，照样能使表达的蛋白正常终止掉（在酵母双杂的AD质粒中，由于插入的是随机cDNA，所以AD的载体上会常见这样的结构）。
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分类
1.根据质粒能否通过细菌的接合作用，可分为接合性质粒和非接合性质粒。
接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
2.根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类：严紧控制型和松弛控制型。
严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用，只能在细胞周期的一定阶段进行复制，当细胞染色体停止复制时，质粒也就不再复制。
松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响，在整个细胞生长周期中随时都可以复制，在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
3.根据质粒的不相容性，可分为不相容性和相容性。
不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象，反之为相容性。常用于流行病学的调查。
⑹ pET-32a携带标签大小究竟是多少
很简单，pet32a表达的是6*his标签的蛋白，你表达的基因如果有x个氨基酸，则蛋白大小约为(x+6)*110/1000kd。
⑺ pet-32a载体在进行原核表达的时候与目的基因连接时不需要酶切吗
需要啊，首先载体与目的基因酶切后，再用T4DNA连接酶连接起来，然后转化感受态
⑻ 如何计算融合蛋白的大小在PET-32a载体里表达后
很简单，pET32a表达的是6*HIS标签的蛋白，你表达的基因如果有x个氨基酸，则蛋白大小约为(x+6)*110/1000KD。
⑼ 您好，我看您在表达载体这一块懂的比较多，我想请教您我构建PET32a表达载体，但是没有办法表达，求原因
首先分析测序结果是否正确，融合表达有没有同框，其次分析是没有表达还是表达较弱，可以采用Western检测目标蛋白或者检测标签，如果是弱表达的话就需要优化表达条件。还有就是你构建的载体有没有转化进入表达宿主细胞，同时也要考虑密码子偏好性的问题。
⑽ pet32a是什么原理
就是质粒的原理